本文關鍵詞：抗TRPC6多肽單克隆抗體的制備與鑒定

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【摘要】：目的制備抗TRPC6多肽單克降抗體,并對其免疫學和生物學特性進行鑒定。方法采用TRPC6多肽偶聯(lián)血藍蛋白(KLH)為抗原,免疫Balb/c小鼠,取血清效價高者脾細胞與Ag8.653骨髓瘤細胞進行融合。采用間接ELISA法篩選陽性雜交瘤細胞,以及測定單克隆抗體的特性、效價及其相對親和力;采用單克隆抗體亞類檢測試劑盒鑒定Ig亞型;并經(jīng)有限稀釋法克隆化培養(yǎng)獲得雜交瘤細胞株;采用秋水仙素阻斷法鑒定雜交瘤細胞株染色體。結果獲得3株能穩(wěn)定分泌抗TRPC6多肽的單克隆抗體,分別命名為A2、F11和H8;抗體Ig亞類均為IgG1型,染色體均在89±7條的范圍內;相對親和力結果 F11為6μg/ml,A2、H8為12.5μg/ml。結論抗TRPC6多肽單克隆抗體的成功制備,為TRPC6的免疫學檢測方法的建立奠定基礎。
【作者單位】： 廣東藥學院微生物學與免疫學教研室;廣州醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院呼吸疾病國家重點實驗室;中山市博愛醫(yī)院腎內科;
【關鍵詞】： TRPC 多肽 單克隆抗體 雜交瘤
【基金】：中山市科技計劃項目(20102A021) 華南中醫(yī)藥城項目(20101H014)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 瞬時受體電位陽離子通道6(transient receptorpotential channel,TRPC6)是一個含有931個氨基酸的6次跨膜蛋白,其N端和C端都位于胞內,且有1個假定的小孔區(qū)域在第5和第6跨膜區(qū)之間,并由第5和第6跨膜區(qū)構成了非選擇性陽離子通道[1]。TRPC6通道研究至今已明確在人體多個部位均有

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本文編號：649388