人類多重剪接RNA結(jié)合蛋白類基因的克隆和分析
本文關(guān)鍵詞:人類多重剪接RNA結(jié)合蛋白類基因的克隆和分析
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【摘要】:目的通過同源篩選的方法拼接并克隆人類多重剪接RNA結(jié)合蛋白2(RBPMS2)基因。方法采用同源篩選策略,以人RBPMS2基因作為信息探針,在GeneBank數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行分析,將獲得的高度同源的表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)用VECTOR NTI軟件拼接成重疊群。通過UCSCGenome Blat Server分析,確定RBPMS2基因的染色體定位,SMART網(wǎng)上分析工具進(jìn)行結(jié)構(gòu)域預(yù)測,Unigene數(shù)據(jù)庫進(jìn)行表達(dá)譜分析。結(jié)果電子克隆到人類RBPMS2新基因cDNA序列,含完整的開放閱讀框(ORF)。RBPMS2基因編碼的多肽由209個氨基酸組成,分子量22.5KDa,等電點8.63。SMART分析顯示RBPMS2蛋白包含1個RNA識別模體(RRM)結(jié)構(gòu)域。RBPMS2基因位于第15號染色體,定位在15q22.31,由7個外顯子和6個內(nèi)含子組成。電子表達(dá)譜分析顯示RBPMS2在卵細(xì)胞、受精卵、囊胚、不同發(fā)育階段的胚胎、膀胱、腎臟等組織中高表達(dá)。結(jié)論分析并克隆到了一個新的人類RBPMS2基因。
【作者單位】: 蘇州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院檢驗藥學(xué)系;蘇州大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與生物科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 多重剪接RNA結(jié)合蛋白 克隆
【分類號】:R346
【正文快照】: 電子克隆是近年來伴隨著基因組計劃和表達(dá)序列標(biāo)簽(EST)計劃發(fā)展起來的一種有效的基因克隆新方法[1],主要原理是利用日益擴(kuò)充的生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫,借助電子計算機(jī)的巨大運(yùn)算能力,依據(jù)相關(guān)生物學(xué)原理,將EST或基因組的序列組裝和拼接,進(jìn)一步利用RT-PCR方法快速克隆功能基因。隨
【參考文獻(xiàn)】
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6 李俊華;吳少庭;翁亞彪;甘燕;劉洪波;劉茂鈴;張仁利;高世同;黃達(dá)娜;耿藝介;;弓形蟲致密顆粒蛋白GRA4基因體外擴(kuò)增、克隆及在Mycobacterium smegmatis mc2155中的表達(dá)[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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9 張磊;杜氏鹽藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗體的制備及其在MDCK細(xì)胞中的定位[D];鄭州大學(xué);2010年
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【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號:648830
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