本文關鍵詞：TaqMan-MGB探針檢測文森巴爾通體博格霍夫亞種實時熒光定量PCR方法的建立及應用

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【摘要】：【目的】應用TaqMan-MGB探針技術,建立具有種水平特異性、高敏感性的熒光定量PCR方法,用于快速檢測文森巴爾通體博格霍夫亞種�！痉椒ā吭谛蛄刑禺愋詳U增區(qū)標記(Sequence characterized amplifiedregion,SCAR)技術基礎上,依據文森巴爾通體博格霍夫亞種一段特有的基因序列設計探針和引物,分別優(yōu)化擴增反應的退火溫度、探針和引物的反應濃度;分析此方法的特異性、敏感性及重復性;繪制標準曲線,評估PCR反應的擴增效率和穩(wěn)定性。【結果】本研究設計的TaqMan-MGB探針具有種水平特異性;最低檢出限為每個PCR反應11個拷貝;組內和組間的變異系數CV值分別為0.12%-0.70%和0.14%-0.55%,在允許范圍內;標準曲線線性關系良好(R2=1),擴增效率高(E=104.7%)�！窘Y論】本研究建立的基于TaqMan-MGB探針技術的熒光定量PCR方法能夠在種水平特異性、高靈敏度檢出文森巴爾通體博格霍夫亞種,為這種巴爾通體所引起的一系列疾病的早期快速診斷、監(jiān)測和流行病學調查等研究提供有效手段。
【作者單位】： 中國疾病預防控制中心傳染病預防控制所傳染病預防控制國家重點實驗室世界衛(wèi)生組織媒介生物監(jiān)測與管理合作中心;
【關鍵詞】： 巴爾通體 熒光定量PCR TaqMan-MGB探針 犬 SCAR標記
【基金】：十二五重大專項“重大傳染病應急處置檢測技術平臺”課題(2011ZX10004-001)~~
【分類號】：S852.61;R378
【正文快照】： 文森巴爾通體博格霍夫亞種(Bartonella vinsoniisubsp.berkhoffii,Bvb)是一種能夠引起犬心內膜炎、紫癜性肝炎、心肌炎和肉芽腫性淋巴結炎等疾病的革蘭陰性桿菌[1],也可以引起人心內膜炎[2]和神經系統(tǒng)疾病等[3]。1993年,此菌首先分離自一只患有心內膜炎的病犬[4],是巴爾通體

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