本文關(guān)鍵詞：低溫保存脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性評價

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【摘要】：目的探討低溫保存對小鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADMSCs)體外培養(yǎng)的生物學(xué)特性和分化潛能的影響。方法分離、培養(yǎng)小鼠ADMSCs,取第3代細(xì)胞置于液氮深低溫(-196℃)凍存12個月后復(fù)蘇。MTT法測定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色檢測衰老;免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測細(xì)胞表面分子CD73、CD90和CD105;條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)后,免疫熒光法檢測心肌特異性肌鈣蛋白(cTnT),茜素紅、堿性磷酸酶和油紅O染色檢測成骨、成脂誘導(dǎo)分化潛能,Real time-PCR檢測cTnT、Gata4、Ost和Runx2。未經(jīng)低溫保存的第3代ADMSCs為對照。結(jié)果低溫保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率與未凍存細(xì)胞比較差異無顯著性(P0.05)。誘導(dǎo)后ADMSCs的cTnT陽性表達(dá)、茜素紅、堿性磷酸酶和油紅O染色呈陽性反應(yīng),凍存組與對照組比較差異無顯著性(P0.05)。結(jié)論低溫保存對ADMSCs體外生長特性和成心肌、成脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞的分化潛能差異無顯著性。
【作者單位】： 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院河南省醫(yī)用組織再生重點實驗室;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞分化 細(xì)胞增殖 細(xì)胞衰老 低溫保存 免疫熒光 實時定量PCR
【基金】：河南省杰出創(chuàng)新人才計劃資助項目(084200410020)
【分類號】：R329
【正文快照】： 脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived mesen-chymal stem cells,ADMSCs)由于其來源充足,獲取簡單,對患者損傷小等優(yōu)點,已在組織工程研究和細(xì)胞治療方面受到廣泛重視。目前采用的長期保存干細(xì)胞的方法通常是低溫凍存,建立細(xì)胞庫,以滿足在需要時進(jìn)行擇期自體細(xì)胞移植或者急診同

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本文編號：640450