本文關(guān)鍵詞：促細(xì)胞增殖新基因TOX的功能研究

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【摘要】：利用GenBank中的數(shù)據(jù),通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)從人的cDNA文庫中克隆得到功能基因TOX(thymocyte selection-associated high mobility group box),運用生物信息學(xué)分析其結(jié)構(gòu)特性,并通過逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)分析TOX在細(xì)胞系中的表達(dá);利用熒光顯微鏡觀察其亞細(xì)胞定位情況;使用細(xì)胞生長曲線實驗和流式細(xì)胞術(shù)分析TOX對細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的影響.結(jié)果表明:TOX基因定位于人8號染色體q12.1上,全長4 131bp,編碼526個氨基酸,該蛋白質(zhì)分子質(zhì)量約為57ku,含有9個外顯子和8個內(nèi)含子,其編碼蛋白為高遷移率蛋白家族成員,能參與基因調(diào)控等生理過程;TOX基因在白血病細(xì)胞系Jurkat和Raji中高表達(dá),并定位于細(xì)胞核中;對細(xì)胞生長曲線繪制及細(xì)胞周期分析表明,TOX能夠使細(xì)胞生長速度加快,且S期細(xì)胞比例明顯上升.說明TOX參與了細(xì)胞增殖調(diào)控,有可能研究開發(fā)為藥物靶標(biāo)或疾病標(biāo)志物.
【作者單位】： 北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)系;北京大學(xué)人類疾病基因研究中心;國家人類基因組北方研究中心;
【關(guān)鍵詞】： TOX基因 細(xì)胞增殖 細(xì)胞周期 藥物靶標(biāo) 疾病標(biāo)志物
【基金】：國家“863”計劃“十二五”重點項目“藥靶發(fā)現(xiàn)與藥物分子設(shè)計技術(shù)”資助(2012AA020303) 國家自然科學(xué)基金資助項目(30900730) 國家重大新藥創(chuàng)制專項“新藥研究開發(fā)關(guān)鍵技術(shù)研究”資助項目(2009ZX09503-004)
【分類號】：R392
【正文快照】： 人類基因組計劃的完成為功能基因組計劃奠定了基礎(chǔ),基于細(xì)胞水平的功能基因高通量篩選技術(shù)已逐漸形成和發(fā)展,并廣泛應(yīng)用于大量未知功能基因的研究中。通過在體外培養(yǎng)的細(xì)胞中過表達(dá)或抑制表達(dá)待研究的基因,分析其所產(chǎn)生的信號傳導(dǎo)通路或細(xì)胞表型的改變,可直接發(fā)現(xiàn)一批具有重要

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