發(fā)布時間：2017-08-07 04:11

  本文關(guān)鍵詞：免疫磁珠熒光量子點技術(shù)檢測結(jié)核分枝桿菌

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【摘要】：目的篩選結(jié)核分枝桿菌(MTB)免疫磁珠熒光量子點檢測方法的最佳配體組合。方法將本室篩選獲得的MTB結(jié)合肽H8和商業(yè)化抗MTB多克隆抗體(Pab)與納米磁珠偶聯(lián),多肽H8、商業(yè)化抗MTB單克隆抗體(Mab)和抗熱休克蛋白65單克隆抗體(Mabc)與熒光量子點偶聯(lián),分別獲得2種免疫磁珠和三種功能化熒光量子點,兩兩組合用于MTB檢測,通過顯微鏡下觀察熒光信號以及激光誘導熒光儀測量熒光值,判斷不同配體組合與MTB的親和性及特異性,獲得最佳組合及其檢測下限。結(jié)果偶聯(lián)Mabc的熒光量子點與免疫磁珠MNP-Pab組合檢測MTB結(jié)果為陰性,其余5組均為陽性。測量熒光值,檢測效果較好的兩組組合分別是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,陽性熒光值與陰性對照組比值分別是4.394和3.956,檢測下限均是102條菌/mL。6組組合與12種非結(jié)核分枝桿菌(NTM)的親和性各異,而與3種非分枝桿菌均不結(jié)合。結(jié)論 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8兩組檢測效果較好,與MTB親和性較高,特異性較好,可作為MTB免疫磁珠熒光量子點檢測技術(shù)的最佳配體組合。
【作者單位】： 同濟大學附屬上海市肺科醫(yī)院結(jié)核病診療中心上海市結(jié)核病(肺)重點實驗室;蘇州大學基礎(chǔ)醫(yī)學與生物科學學院;同濟大學先進材料與納米生物醫(yī)學研究院;山西省兒童醫(yī)院醫(yī)學檢驗中心;
【關(guān)鍵詞】： 免疫磁珠 熒光量子點 分枝桿菌 結(jié)核 檢測 配體
【基金】：中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費專項基金(1511219013) 上海市科委項目(No.10411955100,11nm0506100)聯(lián)合資助~~
【分類號】：R378
【正文快照】： 結(jié)核病仍是威脅人類健康的主要傳染病,目前市售的抗結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis,MTB)抗體的特異性和敏感性均不高,因此,國內(nèi)外均在尋找新的MTB標識物,建立檢測MTB新方法[1-2]。近年來,納米技術(shù)已經(jīng)廣泛用于普通細菌的檢測中[3],在MTB檢測中也開展了一些研究[4],我們利用前期

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