本文關(guān)鍵詞：Runx2通過抑制細(xì)胞巨自噬以誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化

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【摘要】：目的:探討細(xì)胞巨自噬與Runx2誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞成骨分化的關(guān)系。方法:在強(qiáng)力霉素(doxycyc-line,Dox)誘導(dǎo)Runx2表達(dá)的細(xì)胞系C2C12/Runx2Dox中進(jìn)行研究。Dox(10 mg/L)處理0 d、1 d、3 d及6 d后,real-time qPCR檢測(cè)LC3b、Beclin-1、p62和LAMP-2表達(dá)情況,Western blotting分析LC3-I/LC3-Ⅱ比值。設(shè)置不同的3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或雷帕霉素(rapamycin,Rap)濃度,Dox處理14 d后分析堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)活性。用3-MA(5 mmol/L)或Rap(10μmol/L)與Dox共同處理1 d、3 d及6 d后檢測(cè)ALP及骨鈣素(osteocalcin,OC)表達(dá)情況。結(jié)果:(1)C2C12細(xì)胞向成骨分化時(shí),LC3b與Beclin-1顯著下調(diào),p62與LAMP-2無明顯變化;(2)LC3-I向LC3-Ⅱ轉(zhuǎn)換的過程被抑制;(3)3-MA(5 mmol/L)可增強(qiáng)ALP活性,而Rap(10μmol/L)則抑制其活性;(4)3-MA可上調(diào)ALP及OC表達(dá),Rap則下調(diào)二者表達(dá)。結(jié)論:Runx2通過下調(diào)LC3和Beclin-1、抑制LC3-I向LC3-Ⅱ轉(zhuǎn)換的方式阻礙自噬體形成,以誘導(dǎo)C2C12細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞。
【作者單位】： 基因工程藥物國(guó)家工程研究中心教育部基因組藥物工程研究中心廣東省生物工程藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室暨南大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院生物醫(yī)藥研究院;
【關(guān)鍵詞】： Runx CC細(xì)胞 成骨分化 巨自噬
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金重大研究計(jì)劃培育項(xiàng)目(No.90919050)
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： Runx2(又稱Cbfa1、AML3或PEBPa2A)是調(diào)節(jié)成骨分化及骨發(fā)育的關(guān)鍵因子,由Runt結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)與順式原件OSE2(5'-TGTGGT-3')結(jié)合啟動(dòng)靶基因轉(zhuǎn)錄[1]。Runx2缺陷型的純合體小鼠缺乏骨骼礦化的能力,產(chǎn)后立即死亡;雜合體可存活,但骨骼系統(tǒng)存在缺陷[2]。Runx2過表達(dá)的轉(zhuǎn)基因小鼠出現(xiàn)骨質(zhì)

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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7 馬劍雄;馬信龍;李稚君;孫曉雷;朱少文;;體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞對(duì)自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向成骨分化的影響[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 陳微微;NELL-1蛋白對(duì)小鼠ATDC5細(xì)胞軟骨分化的調(diào)控機(jī)制和對(duì)人血管周細(xì)胞成骨分化作用的研究[D];浙江大學(xué);2011年

2 劉立躍;流體剪切力影響人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2011年

3 楊瑞年;BMP-2因素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng)干細(xì)胞成骨分化以及相關(guān)基因表達(dá)的影響研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2012年

4 楊勇;電磁場(chǎng)促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及初步機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2010年

5 黃姍;miR-22對(duì)人脂肪組織來源間充質(zhì)干細(xì)胞成脂成骨分化的調(diào)控作用及其分子機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

6 張錦芳;miR-20調(diào)控人骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及機(jī)理研究[D];清華大學(xué);2010年

7 李洪偉;硅酸二鈣涂層離子溶液促進(jìn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2011年

8 楊楠;miR-21及其靶基因Sprouty1調(diào)控人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2012年

9 朱幫福;重組人骨形成蛋白成骨分化及其定量測(cè)活的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 孟令儀;Osterix在間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化過程中作用的初步研究[D];東北師范大學(xué);2010年

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10 羅嘉全;hMSCs成骨分化相關(guān)IncRNAs的篩選和鑒定[D];南昌大學(xué);2012年

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