本文關(guān)鍵詞：小鼠子宮珠蛋白結(jié)合蛋白的生物信息學(xué)分析及其多克隆抗體制備

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【摘要】：本文旨在制備小鼠子宮珠蛋白結(jié)合蛋白(mouse uteroglo binbinding protein,mUGBP)多克隆抗體,為后續(xù)研究工作奠定基礎(chǔ)。通過生物信息學(xué)分析方法預(yù)測mUGBP蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)、理化特性、疏水性等因素,設(shè)計出兩段多肽,分別與匙孔戚血藍(lán)蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)交聯(lián)后免疫新西蘭兔,結(jié)果顯示其中一個含13個氨基酸殘基的多肽序列(221st～233rd)可用作抗原免疫動物,并成功獲得高效價的抗mUGBP多克隆抗體。通過ELISA法檢測其效價為1:108,親和層析純化后Westernblot檢測抗體特異性,并將制備的抗體應(yīng)用于免疫印跡及人和小鼠肺組織免疫組織化學(xué)和免疫熒光檢測,結(jié)果顯示本研究制備的抗體具有特異性,且用該抗體成功在人和小鼠氣道上皮細(xì)胞和肺血管內(nèi)皮細(xì)胞檢測到UGBP蛋白表達(dá)。結(jié)果表明,本研究通過生物信息學(xué)方法成功預(yù)測了抗原表位,并據(jù)此預(yù)測成功制備了高效價、高特異性的抗mUGBP多克隆抗體。
【作者單位】： 中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系;長治醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 子宮珠蛋白 小鼠 抗體 生物信息學(xué)
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.30670770,30870916,81100057) Precision Instruments Sharing Foundation of Central South University,China(No.2012-02,2012-12)
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 子宮珠蛋白(uteroglobin,UG)是由襯覆于遠(yuǎn)端細(xì)支氣管的非纖毛上皮細(xì)胞Clara細(xì)胞所分泌的一種在進化上保守的小分子蛋白,因最早在兔的子宮內(nèi)膜發(fā)現(xiàn)并由此命名,也稱為Clara細(xì)胞分泌蛋白(Clara cell secretory protein,CCSP)、Clara細(xì)胞蛋白10(CC10)、Clara細(xì)胞蛋白16(CC16),是

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1 張進順;朱靜和;;小鼠抗日本血吸蟲抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用的研究[J];河北北方學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);1990年01期

2 李章球;張梅霞;胡海燕;劉順會;陸志剛;;GPⅡb/Ⅲa抗體的二級結(jié)構(gòu)及T、B細(xì)胞表位的預(yù)測[J];生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志;2010年05期

3 雷麗萍;重組約氏瘧原蟲裂殖子表面蛋白4/5對小鼠致死性攻擊的免疫保護[J];國外醫(yī)學(xué).寄生蟲病分冊;2002年01期

4 郇天笑;王澤;張輝;白增亮;;甲胎蛋白分子演化的生物信息學(xué)分析[J];山東大學(xué)學(xué)報(理學(xué)版);2007年03期

5 顧文霞,趙晶,張昌穎;小鼠S_(180)瘤細(xì)胞免疫性的初步研究[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;1984年Z1期

6 劉津紅;病毒誘導(dǎo)的甲狀腺炎[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊;1988年03期

7 秦衛(wèi)兵,蔣建偉,張金萍,肖昕,周羽并,林晨;CpG ODN增強免疫力低下小鼠對乙肝疫苗的體液免疫應(yīng)答[J];安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2003年02期

8 李子健,金寧一,江文正,張立樹;小鼠對HIV-2gp105核酸疫苗免疫應(yīng)答的研究[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2005年01期

9 吳吉文;卓麗圣;王瑋;;TSG-6和連接蛋白在小鼠卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合體的共位性分析[J];解剖學(xué)雜志;2006年01期

10 孫安;高卓平;段學(xué)軍;席愛民;張艷;;表皮生長因子受體在小鼠胚胎鼻中隔軟骨細(xì)胞中的表達(dá)[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2006年10期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 桂耀庭;唐愛發(fā);余振東;張立兵;張鍵榮;李賢新;蔡志明;;精子發(fā)生相關(guān)基因的篩選和功能研究[A];第一屆中華醫(yī)學(xué)會生殖醫(yī)學(xué)分會、中國動物學(xué)會生殖生物學(xué)分會聯(lián)合年會論文匯編[C];2007年

2 王智宇;童強松;曾甫清;劉媛;顧朝輝;鄭麗端;蔡嘉斌;蔣國松;;小鼠睪丸特異性基因TSEG-4的克隆及表達(dá)分析[A];第十五屆全國泌尿外科學(xué)術(shù)會議論文集[C];2008年

3 邱潔;周曉玉;程銳;張敏;張春梅;季晨博;高春林;郭錫熔;;人類肥胖相關(guān)新基因LYRM1的生物信息學(xué)分析及TA克隆載體的構(gòu)建[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

4 馬寧;張正國;;基于信息變化量衡量主成份分析在基因芯片聚類中的作用[A];第十屆中國科協(xié)年會論文集（三）[C];2008年

5 張偉;馮娟;陳煒;張小娟;袁樹民;廉虹;張連峰;;系統(tǒng)表達(dá)HB-EGF轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[A];實驗動物與藥理學(xué)、毒理學(xué)研究學(xué)術(shù)交流會論文匯編[C];2009年

6 宋震宇;劉金明;何金桃;孫帥;石耀軍;李浩;陸珂;林矯矯;岳城;;東方田鼠血清篩選噬菌體展示抗原對小鼠日本血吸蟲病免疫效果觀察[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會家畜寄生蟲學(xué)分會第六次代表大會暨第十次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2009年

7 黃巧冰;李巧琴;王陵軍;郭曉華;陳波;李強;;膜突蛋白Moesin在AGEs刺激小鼠各器官磷酸化及其機制研究[A];第十次中國中西醫(yī)結(jié)合微循環(huán)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2010年

8 劉向前;吳少庭;秦莉;袁仕善;黃達(dá)娜;雷明軍;潘暉榕;林綺萍;張仁利;高世同;劉能保;;幾種SARS DNA疫苗對Balb/c小鼠重要器官影響的組織病理學(xué)研究[A];全國寄生蟲學(xué)與熱帶醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

9 馮林;鄭峻松;刁慶春;;MRL/lps小鼠中CD4~+CD25~+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會皮膚科分會第七次學(xué)術(shù)年會、2010年重慶四川中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)年會、全國中西醫(yī)結(jié)合診療皮膚性病新進展新技術(shù)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2010年

10 譚小玲;許蜀閩;陳麗;高鈺琪;;模擬8000m高原對小鼠肺組織中IPAS和Tra2β表達(dá)的影響[A];中國病理生理學(xué)會第九屆全國代表大會及學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2010年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 記者　 任荃 記者 陳青;老鼠“制藥廠”生產(chǎn)人類抗體[N];文匯報;2006年

2 王振坤;人體血液防線之五[N];家庭醫(yī)生報;2007年

3 周松;TRPM8是“冷”蛋白[N];中國醫(yī)藥報;2007年

4 吳曉東;中美交流人類和小鼠全基因組功能分析研究[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2001年

5 吳m#麓;小鼠醫(yī)院：老鼠為我們而病[N];北京科技報;2008年

6 記者 李天舒;HER2抗體新免疫機制被發(fā)現(xiàn)[N];健康報;2010年

7 記者 白毅;HER2抗體抗腫瘤效應(yīng)免疫新機制被發(fā)現(xiàn)[N];中國醫(yī)藥報;2010年

8 魏忠杰;人體乳腺癌病毒可能源自小鼠[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年

9 記者　 江世亮;終極分化體細(xì)胞克隆小鼠成功[N];文匯報;2006年

10 田學(xué)科;以科學(xué)家發(fā)現(xiàn)治療癌癥新方法[N];科技日報;2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林劍萍;重組SARS-CoV S蛋白表位肽疫苗的研究[D];吉林大學(xué);2005年

2 趙文忠;小鼠TLR-2的克隆、表達(dá)及其抗體的生物活性研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 孫強;小鼠分泌性蛋白的大規(guī)模鑒定與分析[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 李巍;天然抗角蛋白自身抗體轉(zhuǎn)基因小鼠的建立及相關(guān)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

5 袁紅豐;人10號染色體長臂上兩個新基因——N-RAP和MOB的克隆與功能分析[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

6 李麗;系統(tǒng)性紅斑狼瘡抗核抗體易感基因染色體定位研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2004年

7 趙慶國;GGNBP1和GGN2在小鼠睪丸中的表達(dá)及相互作用研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

8 陳杰;IL-33/ST2L通路參與Con A所致小鼠肝損傷的作用及其機制[D];華中科技大學(xué);2012年

9 華芳;γδT調(diào)節(jié)細(xì)胞的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2012年

10 楊雁靈;抗獨特型抗體誘導(dǎo)對小鼠移植免疫反應(yīng)的抑制作用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2001年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 方志友;合成PHA基因組克隆片段的序列分析及相關(guān)基因的分離[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2002年

2 楊煒曦;新肌纖生成調(diào)節(jié)因子MR-1基因功能的初步探討[D];吉林大學(xué);2004年

3 賀厚光;小鼠尿道下裂動物模型的建立[D];南京醫(yī)科大學(xué);2004年

4 顧克菊;免疫抑制宿主Toll樣受體表達(dá)及對煙曲霉菌感染免疫應(yīng)答[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 趙蕾;人UBF新基因功能的初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

6 時淑娟;雌二醇和孕酮對小鼠免疫器官淋巴細(xì)胞的調(diào)節(jié)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2005年

7 秦迎;小鼠子宮內(nèi)膜中DBA、ECL和RCA-Ⅰ受體在胚泡植入過程中的表達(dá)狀況的實驗研究[D];山東大學(xué);2005年

8 智建生;雌二醇和孕酮對小鼠心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2006年

9 鄭小莉;ONO-AE-248誘發(fā)中性粒細(xì)胞非凋亡性程序化死亡的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2006年

10 成先桂;馬爾尼菲青霉菌野生株和臨床分離株致病力動物實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

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本文編號：618850