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mirRNA質(zhì)粒和RAN干擾技術(shù)下調(diào)人臍血干細(xì)胞基因的研究

發(fā)布時(shí)間:2017-08-01 03:15

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【摘要】:目的探討microRNA(miR)30為基礎(chǔ)的shRNA干擾技術(shù)能否有效下調(diào)人臍血干細(xì)胞的基因。方法應(yīng)用不同的第2代慢病毒包裝質(zhì)粒在293T細(xì)胞中包裝病毒,檢測病毒滴度和人臍血CD34+細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果第2代慢病毒包裝質(zhì)?稍谌293T細(xì)胞中產(chǎn)生高滴度病毒(2×106TU/mL以上)。與包裝質(zhì)粒pCMV-dR8.91(6.8%~17.4%,平均14.2%)相比,pCMV-dR8.74(psPAX2)(12.3%~31.8%,平均26.5%,P0.05)產(chǎn)生的病毒轉(zhuǎn)染臍血干細(xì)胞的效率更高。結(jié)論應(yīng)用shRNAmir和RNA干擾技術(shù)可有效下調(diào)人臍血CD34+細(xì)胞的基因。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院輸血科;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院血液學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】RNA干擾 嵌入microRNA的短鏈發(fā)夾RNA 臍血
【分類號(hào)】:R341
【正文快照】: RNA干擾技術(shù)(RNA interference,RNAi)是目前在多種細(xì)胞模型中廣泛應(yīng)用的通過下調(diào)基因表達(dá)、進(jìn)行相關(guān)基因功能缺失后研究的有效手段[1~3]。病毒載體基礎(chǔ)上的短鏈發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)是目前應(yīng)用最多的RNA干擾方法,但是往往受到組織特異性低,選擇性下調(diào)效果差和長

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1 張楚;王雨生;吳紅;張朝霞;蔡巖;馬吉獻(xiàn);;玻璃體內(nèi)注射載HIF-1α shRNA質(zhì)粒的PLGA納米粒眼部轉(zhuǎn)染效率[J];眼科研究;2009年06期

2 劉春亮;林丹丹;徐嵐;姜智;吳士良;;慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾ppGalNAc-T2基因表達(dá)抑制Jurkat細(xì)胞增殖和遷移(英文)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2011年08期

3 劉鳳斌;李建福;陳曉芳;湯蘇陽;;以miRNA為基礎(chǔ)的RNA干擾線粒體相關(guān)基因TFAM和POLG的研究[J];軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院學(xué)報(bào);2011年09期

4 趙煥英;包金風(fēng);趙春禮;楊慧;徐群淵;;應(yīng)用載體介導(dǎo)的RNA干擾技術(shù)抑制Nurr1基因在PT67細(xì)胞中的表達(dá)[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2007年02期

5 李玉紅;宋文濤;廖漢林;畢勇毅;;CYP4F3基因RNA干擾重組慢病毒載體的構(gòu)建[J];江蘇醫(yī)藥;2011年14期

6 梁英;吳偉忠;李薇薇;張寧;孫惠川;王魯;夏景林;;靶向Arnt的RNAi慢病毒載體的構(gòu)建及其在HCCLM6中對(duì)Arnt基因表達(dá)的影響[J];中國臨床醫(yī)學(xué);2008年06期

7 季國忠;張發(fā)明;翟惠虹;范志寧;樊代明;王學(xué)浩;;Smad4基因RNAi慢病毒載體的構(gòu)建與鑒定[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2006年07期

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9 蘇蔚;房成;楊海春;陳靖;顧勇;郝傳明;;巢蛋白對(duì)維持足細(xì)胞形態(tài)作用的探討[J];中國病理生理雜志;2009年01期

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1 張金嶺;;慢病毒介導(dǎo)的多干擾技術(shù)協(xié)同下調(diào)CD28和CD25分子抑制淋巴細(xì)胞活化的試驗(yàn)研究[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

2 陳,

本文編號(hào):602286


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