磁性納米顆粒與脂質(zhì)體介導(dǎo)REST-siRNA轉(zhuǎn)染hADSCs的比較
發(fā)布時(shí)間:2017-07-29 13:21
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【摘要】:目的對聚乙烯亞胺包被的磁納米顆粒(PEI-SPIO)與脂質(zhì)體(lipofectamineTM2000)作為基因載體轉(zhuǎn)染人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(hADSCs)的可行性及轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)染效率及基因瞬時(shí)干擾效率進(jìn)行比較分析。方法分別將PEI-SPIO和lipofectamineTM2000作為基因載體連接REST-siRNA體外轉(zhuǎn)染hADSCs,用MTT法檢測hADSCs增殖和功能;用熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率;分別用Real-time PCR和Western blot檢測REST的表達(dá)。結(jié)果用磁性納米顆粒和脂質(zhì)體作為基因載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,細(xì)胞成活率分別為99%和79%(P0.05);磁納米顆粒和脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染效率無差異,分別為75%和71%;磁納米顆粒和脂質(zhì)體作為基因載體時(shí)RNA表達(dá)量分別為(0.46±0.04)和(0.53±0.05),蛋白水平表達(dá)量分別為(0.501±0.006)和(0.523±0.004)。結(jié)論磁性納米顆粒因其具有低細(xì)胞毒性可代替脂質(zhì)體作為轉(zhuǎn)染干細(xì)胞的基因載體。
【作者單位】: 中國醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生部細(xì)胞生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室干細(xì)胞與再生醫(yī)學(xué)研究室;中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院全科醫(yī)學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 磁性納米顆粒 聚乙烯亞胺 脂質(zhì)體 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 轉(zhuǎn)染
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃(2012CB518103) 遼寧省科學(xué)技術(shù)計(jì)劃(2012225080) 沈陽市科學(xué)技術(shù)計(jì)劃(F11-262-9-01)
【分類號】:R329.28
【正文快照】: 人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose mesenchy-mal stem cells,hADSCs)在體外易于分離、擴(kuò)增,在適當(dāng)?shù)臈l件下具有多向分化潛能,并且可以進(jìn)行自體移植,廣泛遷移,易與周圍組織整合而發(fā)揮功能[1],提示其在細(xì)胞治療中可能成為非常有價(jià)值的運(yùn)載細(xì)胞。隨著hADSCs在基因治療中的應(yīng)用被
【參考文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條
1 鄧瑋;陳慶偉;王麗;王鵬;吳志勤;楊彥;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對缺血心肌的血管新生及增殖-凋亡的影響[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2012年04期
2 欒云;劉曉程;張兆華;程廣輝;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療小型豬急性心肌梗死[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2011年10期
【共引文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
1 束波;劉志江;范芳;;基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α預(yù)處理對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外存活及旁分泌的影響[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2012年08期
2 冷良;徐e,
本文編號:589404
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