本文關(guān)鍵詞：肝星狀細(xì)胞具有向肝細(xì)胞樣細(xì)胞分化的干細(xì)胞潛能

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【摘要】：目的探討肝星狀細(xì)胞是否能體外誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞以及在這過程中某些干細(xì)胞標(biāo)記物的表達(dá)和變化。方法采用標(biāo)準(zhǔn)膠原酶灌注聯(lián)合percoll密度梯度離心法提取并純化原代大鼠肝星狀細(xì)胞,免疫熒光鑒定細(xì)胞表型;將原代肝星狀細(xì)胞分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行體外培養(yǎng),對(duì)照組肝星狀細(xì)胞不加任何細(xì)胞因子培養(yǎng)24 h,實(shí)驗(yàn)組肝星狀細(xì)胞加入bFGF 20μg/L、FGF420μg/L、HGF 20μg/L、IL-6 1μg/L細(xì)胞因子誘導(dǎo)7 d;倒置相差顯微鏡下觀察誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)的變化,Real-time PCR和細(xì)胞免疫熒光技術(shù)檢測(cè)肝星狀細(xì)胞誘導(dǎo)前后肝細(xì)胞ALB、AFP mRNA和蛋白的表達(dá)情況,以及誘導(dǎo)前后干細(xì)胞標(biāo)記物mRNA和蛋白水平的表達(dá)及變化。結(jié)果①通過膠原酶灌注聯(lián)合percoll密度梯度離心法獲得的大鼠肝星狀細(xì)胞,其特異性蛋白Desmin和GFAP表達(dá)陽(yáng)性率≥95%。②實(shí)驗(yàn)組大鼠肝星狀細(xì)胞經(jīng)過bFGF、FGF4、HGF、IL-6等細(xì)胞因子誘導(dǎo)7 d后,與對(duì)照組細(xì)胞相比細(xì)胞形態(tài)由星形變?yōu)轭悎A形或多角形,轉(zhuǎn)錄水平出現(xiàn)肝細(xì)胞特異性標(biāo)記物ALB的表達(dá)(P0.01)和AFP的表達(dá)(P0.05),同時(shí)實(shí)驗(yàn)組ALB和AFP蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性,而對(duì)照組則呈陰性。③實(shí)驗(yàn)組大鼠肝星狀細(xì)胞經(jīng)過bFGF、FGF4、HGF、IL-6等細(xì)胞因子誘導(dǎo)7 d后,與對(duì)照組相比干細(xì)胞標(biāo)記物P75NTR轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)下降(P0.05),CD90、c-kit、sox-2、oct-4等轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)顯著下降(P0.01),并伴有干細(xì)胞標(biāo)記物蛋白水平的表達(dá)下調(diào)或無(wú)表達(dá)。結(jié)論初步證明肝星狀細(xì)胞可能具有潛在的干細(xì)胞特性,在體外可誘導(dǎo)分化形成肝細(xì)胞樣細(xì)胞,在誘導(dǎo)過程中肝星狀細(xì)胞的干細(xì)胞標(biāo)記物明顯下調(diào)。
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 肝星狀細(xì)胞 干細(xì)胞 細(xì)胞分離 誘導(dǎo) 分化
【基金】：重慶市自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(CSTC2009BA5060)~~
【分類號(hào)】：R322.47
【正文快照】： 肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cell,HSC)又稱儲(chǔ)脂細(xì)胞,最早于19世紀(jì)由德國(guó)學(xué)者Von Kupffer研究發(fā)現(xiàn),主要存在于肝竇周Disse間隙內(nèi),儲(chǔ)存維生素A以及調(diào)控肝竇竇內(nèi)血壓血流。既往學(xué)者對(duì)肝星狀細(xì)胞的研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)肝臟受損時(shí),星狀細(xì)胞通過轉(zhuǎn)分化作用形成肌纖維母細(xì)胞,其過度增殖并

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：529931