本文關(guān)鍵詞：牛胚胎骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化

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【摘要】：目的分離培養(yǎng)魯西黃牛胚胎骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,并研究其生物學(xué)特性。方法取30~50 d齡魯西黃牛胚胎四肢骨骼肌,聯(lián)合Ⅰ型膠原酶和胰蛋白酶及差速貼壁法分離獲得骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞,通過免疫細(xì)胞化學(xué)染色和RT-PCR檢測衛(wèi)星細(xì)胞表面標(biāo)志desmin、MyoD、c-Met、Myf5、pax7,并研究其生物學(xué)特性。結(jié)果魯西黃牛衛(wèi)星細(xì)胞傳代培養(yǎng)至15代以上,凍存后細(xì)胞活率為97.90%±0.96%;免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測衛(wèi)星細(xì)胞標(biāo)記物desmin,MyoD呈陽性表達(dá);RT-PCR檢測desmin、c-Met、Myf5、pax7呈陽性表達(dá);克隆形成率為56.39%±1.41%;染色體核型分析顯示分離培養(yǎng)的細(xì)胞均來源于正常牛胚胎個體;通過不同的誘導(dǎo)劑將牛衛(wèi)星細(xì)胞成功地誘導(dǎo)為成骨細(xì)胞和神經(jīng)元樣細(xì)胞,分別進(jìn)行茜素紅,甲苯胺藍(lán)染色呈陽性表達(dá),RT-PCR檢測成骨細(xì)胞標(biāo)記物osteopontin,Ⅰ型膠原蛋白和神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)記物MAP2和nestin均呈陽性表達(dá)。結(jié)論本試驗(yàn)成功地分離獲得了牛衛(wèi)星細(xì)胞,并具有自我更新增殖和多向分化潛能。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 魯西黃牛胚胎 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞 增殖能力 誘導(dǎo)分化
【基金】：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)(2011ZX08009-003-006;2011ZX08012-002-06) 基本科研業(yè)務(wù)項(xiàng)目(2012z1072) 國家家養(yǎng)動物種質(zhì)資源平臺項(xiàng)目(2012年)
【分類號】：R329
【正文快照】： 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(skeletal muscle satellite cells,SC)是具有增殖、自我更新和多向分化潛能的多能干細(xì)胞,最早由Mauro等[1]在蛙骨骼肌中發(fā)現(xiàn)。衛(wèi)星細(xì)胞來源廣泛,在體外具有較強(qiáng)的增殖能力及適應(yīng)能力,在異體移植中免疫原性低,免疫排斥反應(yīng)低,移植后存活時間長,因此在骨骼肌的損

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李方華;侯玲玲;馬月輝;龐全海;關(guān)偉軍;;北京油雞骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離、培養(yǎng)、鑒定及成肌誘導(dǎo)分化的研究[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年22期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 興孝友;佟慧麗;李樹峰;嚴(yán)云勤;;牛骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化方法的建立[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2012年11期

2 邊艷超;牧仁;李向臣;李云章;關(guān)偉軍;;魯西黃牛胚胎骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2013年02期

3 李偉;鄭蒙蒙;邱峰龍;朱才業(yè);韋光輝;王丹;李碧春;;山羊骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞系分離、培養(yǎng)及其成肌誘導(dǎo)分化研究[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2013年01期

4 Yanju SHAN;Jingting SHU;Chi SONG;Yan HU;Jian CHEN;Huifang LI;;Culture and Identification of Myoblasts Isolated from Duck Embryos[J];Agricultural Science & Technology;2014年08期

5 何玉龍;吳月紅;權(quán)富生;劉琴;張涌;;秦川牛胎兒骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分離培養(yǎng)[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2012年06期

6 劉靜;林婉君;劉印忠;李曉眠;郭洪剛;;聯(lián)合誘導(dǎo)兔脂肪源性基質(zhì)細(xì)胞的成肌潛能[J];中國組織工程研究;2013年27期

7 沈林W;張順華;吳澤輝;鄭夢月;李學(xué)偉;朱礪;;骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞對肉品質(zhì)的影響及其分化調(diào)控[J];遺傳;2013年09期

8 許志鋒;李敬來;韓振;馮鋼;任明明;;陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)增強(qiáng)型綠色熒光蛋白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞[J];中國組織工程研究;2013年46期

9 鄭小菊;王繼征;趙鵬;;致心律失常性右心室心肌病與心源性猝死[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2013年18期

10 皇甫一凡;昝林森;王洪寶;成功;劉揚(yáng);高建斌;李耀坤;楊寧;;胰島素誘導(dǎo)牛成肌細(xì)胞成脂分化的研究[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2014年03期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳常信;動物遺傳資源保存的理論與技術(shù)──21世紀(jì)動物農(nóng)業(yè)持續(xù)發(fā)展的種質(zhì)基礎(chǔ)[J];云南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1999年S3期

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 董少紅;張鵬;溫雋珉;高虹;龐新利;;酸性成纖維細(xì)胞生長因子促進(jìn)兔骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞生長的研究[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2007年17期

2 張臻,朱洪生,鐘z，

本文編號：513829