本文關(guān)鍵詞：Gateway技術(shù)構(gòu)建小鼠血管生成素-1慢病毒表達載體及其病毒包裝，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建攜帶小鼠血管生成素-1(Ang-1)基因的慢病毒載體并進行慢病毒包裝。方法利用Gateway技術(shù)構(gòu)建攜帶DsRed熒光蛋白的Ang-1慢病毒載體,經(jīng)PCR及基因測序鑒定后,與輔助質(zhì)粒pLV/helper-SL3、pLV/helper-SL4及pLV/helper-SL5混合采用脂質(zhì)體法制備DNA-Lipofectamine 2000復(fù)合物,并共同轉(zhuǎn)染293FT細胞進行慢病毒包裝,產(chǎn)生相應(yīng)慢病毒顆粒,通過熒光表達情況來測定病毒滴度和感染效率。結(jié)果通過PCR、基因測序證實,Ang-1慢病毒表達載體PLV.Ex3d.P/puro-CMVAng-1IRES/DsRed-Express2構(gòu)建成功。經(jīng)轉(zhuǎn)染293FT細胞包裝出具高效感染力的慢病毒,經(jīng)測定病毒滴度為5×108TU/ml。結(jié)論成功構(gòu)建Ang-1慢病毒表達載體,并包裝出具高效感染力的慢病毒顆粒,為進一步研究Ang-1基因功能及基因治療提供實驗基礎(chǔ)。
【作者單位】： 北京軍區(qū)總醫(yī)院(第二軍醫(yī)大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院)附屬八一兒童醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 血管生成素- 慢病毒 載體 Gateway技術(shù)
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年基金項目(No.81000265);國家自然科學(xué)基金項目(No.81270059)
【分類號】：R363
【正文快照】： 血管生成素(angiopoietin,Ang)是促進血管生成的最重要因子之一。迄今為止,共發(fā)現(xiàn)Ang-1、Ang-2、Ang-3和Ang-4,4種Ang家族成員,其受體分別為Tie-1及Tie-2,其中Ang-1與Tie-2是研究較早的Ang家族成員。研究表明,Ang-1可促進血管重塑,維持血管成熟穩(wěn)定,并具有降低血管通透性和抗

【共引文獻】

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本文編號：496304