本文關(guān)鍵詞：TRPC1缺失對小鼠空間記憶的影響及環(huán)境豐富的干預(yù)作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:經(jīng)典瞬時受體電位I型通道(transient receptor potential channels 1,TRPC1)廣泛表達(dá)于神經(jīng)中樞,但其在腦神經(jīng)的功能尚不清楚。本文旨在探索TRPC1缺失對小鼠空間記憶的影響及環(huán)境豐富(environmental enrichment,EE)的干預(yù)作用。方法:本研究選用3-5月齡的TRPC1敲除小鼠(TRPC1-/-)和野生型小鼠(wide-type,WT)。實驗分為4組:未處理WT小鼠、環(huán)境豐富處理WT小鼠、未處理TRPC1-/-小鼠和環(huán)境豐富處理TRPC1-/-小鼠。環(huán)境豐富處理小鼠時間為6周。采用條件恐懼實驗、Y迷宮實驗和電跳臺實驗檢測TRPC1缺失及環(huán)境豐富處理對小鼠的記憶的影響。通過熒光差異雙向凝膠電泳(two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)結(jié)合質(zhì)譜分析的方法研究TRPC1缺失誘導(dǎo)小鼠記憶損傷的潛在分子機制及環(huán)境豐富的干預(yù)作用機制。免疫熒光組織化學(xué)、尼氏染色和TUNEL染色檢測各組小鼠神經(jīng)細(xì)胞丟失/凋亡變化。使用Western blot分析對蛋白質(zhì)組學(xué)篩選出的差異蛋白進(jìn)行驗證。結(jié)果:條件恐懼實驗、Y迷宮實驗和跳臺實驗結(jié)果一致顯示,TRPC1缺失可誘導(dǎo)小鼠空間記憶損傷,環(huán)境豐富可顯著改善TRPC1-/-小鼠記憶損傷。2D-DIGE結(jié)合質(zhì)譜分析的結(jié)果表明,與野生對照組相比,TRPC1-/-小鼠海馬組織中共發(fā)現(xiàn)10個差異性表達(dá)蛋白。環(huán)境豐富處理的TRPC1-/-小鼠與未處理的TRPC1-/-小鼠相比,其海馬組織中共有22個差異性表達(dá)的蛋白。其中,相比WT小鼠,電壓依賴性陰離子選擇通道蛋白2(Voltage-dependent anion-selective channel protein 2,VDAC 2)在TRPC1-/-小鼠中表達(dá)顯著上調(diào)。相比TRPC1-/-小鼠,與記憶損傷相關(guān)的蛋白α-互聯(lián)蛋白(α-internexin)和神經(jīng)膠質(zhì)成熟因子β(Glia maturation factor beta,GMF-β)在環(huán)境豐富處理的TRPC1-/-小鼠中顯著降低。免疫熒光化學(xué)、尼氏染色和TUNEL均表明TRPC1缺失導(dǎo)致神經(jīng)元丟失/凋亡。Western blot分析發(fā)現(xiàn),α-internexin與GMF-β的表達(dá)水平改變,與2D-DIGE的結(jié)果一致。結(jié)論:綜上結(jié)果表明,TRPC1缺失可誘導(dǎo)小鼠記憶損傷,并改變其海馬組織中多種蛋白的表達(dá),其機制可能是TRPC1缺失導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞丟失相關(guān)。環(huán)境豐富可改善TRPC1缺失誘導(dǎo)的記憶損傷,海馬α-internexin和GMF-β蛋白是參與環(huán)境豐富改善TRPC1缺失誘導(dǎo)的記憶損傷過程的關(guān)鍵分子。
【關(guān)鍵詞】：TRPC1 環(huán)境豐富 記憶損傷 熒光差異雙向凝膠電泳
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 第一章 引言8-13
• 1.1 TRPC1背景介紹8
• 1.2 TRPC1調(diào)節(jié)Ca2+平衡8-9
• 1.3 TRPC1與成體神經(jīng)發(fā)生9-10
• 1.4 環(huán)境豐富10-11
• 1.5 本課題的研究目的、意義與技術(shù)路線11-13
• 第二章 環(huán)境豐富改善TRPC1-/-小鼠記憶損傷13-21
• 2.1 引言13
• 2.2 實驗材料13-14
• 2.3 實驗方法14-15
• 2.4 結(jié)果15-19
• 2.5 討論19-20
• 2.6 本章小結(jié)20-21
• 第三章 環(huán)境豐富對TRPC1-/-小鼠海馬蛋白質(zhì)組的影響21-48
• 3.1 引言21-22
• 3.2 實驗材料22-25
• 3.3 實驗方法25-31
• 3.4 結(jié)果31-46
• 3.5 討論46-47
• 3.6 本章小結(jié)47-48
• 第四章 TRPC1缺失對小鼠腦神經(jīng)細(xì)胞生存的影響48-62
• 4.1 引言48
• 4.2 實驗材料48-49
• 4.3 實驗方法49-55
• 4.4 結(jié)果55-57
• 4.5 討論57-61
• 4.6 本章小結(jié)61-62
• 第五章 結(jié)論與展望62-64
• 5.1 結(jié)論62-63
• 5.2 展望63-64
• 參考文獻(xiàn)64-71
• 附錄71-72
• 碩士期間發(fā)表論文72-73
• 致謝73

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周清明;;~(12)C~(6+)離子輻照小鼠全腦對其空間記憶的影響(英文)[J];IMP & HIRFL Annual Report;2007年00期

2 李凌江,CindyLawler;老年鼠空間記憶功能特征研究[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);1999年01期

3 鄭君芳;陳慧敏;宋然;胡家;沙莎;賀俊崎;;蛋白質(zhì)組學(xué)方法分析多T迷宮訓(xùn)練后的小鼠空間記憶蛋白[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報;2013年11期

4 李文琪;王韻;;成體新生神經(jīng)元參與位置信息的編碼和空間記憶[J];生理科學(xué)進(jìn)展;2008年03期

5 丁小麗,邰發(fā)道;記憶的年齡及性別差異[J];陜西師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2003年S2期

6 鄭君芳;孫超淵;孫麗翠;楊曉梅;王小柱;黃艷;李洋;賀俊崎;;空間記憶相關(guān)蛋白的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];化學(xué)學(xué)報;2010年10期

7 姜京城,隋建峰,趙紅梅,王曉娟;應(yīng)激對大鼠空間記憶發(fā)育的影響[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2002年04期

8 蔡景霞,徐林,胡新天,馬原野,蘇衛(wèi),肖昆媛;恒河猴、懶猴和樹，

本文編號：495862