Wnt3a過表達(dá)對(duì)小鼠胚胎肝干細(xì)胞凋亡的抑制作用
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【摘要】:目的研究Wnt3a對(duì)ELSC14.5小鼠胚胎肝干細(xì)胞凋亡及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。方法采用表達(dá)綠色熒光蛋白的腺病毒載體系統(tǒng)(Ad-GFP-Wnt3a)轉(zhuǎn)入小鼠ELSC14.5細(xì)胞,以Ad-GFP組為空白對(duì)照組,Ad-wnt3a組為實(shí)驗(yàn)組。實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法檢測Wnt3a及凋亡相關(guān)因子Bax、Bcl-2、Mcl-1的mRNA和蛋白的表達(dá);Hoechst33258染色法結(jié)合annexin-PE/7-ADD法檢測細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果 qRT-PCR和Western blot結(jié)果顯示,Wnt3a在ELSC14.5細(xì)胞中特異性表達(dá),表明腺病毒系統(tǒng)Ad-Wnt3a能高效感染ELSC14.5細(xì)胞。與對(duì)照組相比,抗凋亡因子Bcl-2、mcl-1的mRNA和蛋白的表達(dá)顯著升高(P0.05),而促凋亡因子Bax的mRNA和蛋白的表達(dá)顯著降低(P0.05)。Hoechst33258染色結(jié)合annexin-PE/7-ADD法結(jié)果顯示,Wnt3a高表達(dá)的ELSC14.5細(xì)胞核呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染的細(xì)胞數(shù)量很少,細(xì)胞凋亡率降低。結(jié)論 Wnt3a通過上調(diào)Bcl-2家族中抗凋亡因子和下調(diào)促凋亡因子來抑制小鼠胚胎肝干細(xì)胞的凋亡,延長其生存。
【作者單位】: 重慶醫(yī)科大學(xué)分子醫(yī)學(xué)與腫瘤研究中心;重慶醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 胚胎肝干細(xì)胞 抗凋亡 Wnta
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81071770,81201679)
【分類號(hào)】:R329
【正文快照】: 肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界范圍內(nèi)最常見和最致命的癌癥之一。臨床上,肝癌診療中存在著惡性程度極高、預(yù)后極差、治療缺乏針對(duì)性等問題[1]。因此,研究肝癌分子發(fā)病機(jī)制尤為重要和迫切。經(jīng)典Wnt信號(hào)途徑的異常激活會(huì)導(dǎo)致肝癌的發(fā)生[2]。目前,經(jīng)典Wnt信號(hào)通
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本文關(guān)鍵詞:Wnt3a過表達(dá)對(duì)小鼠胚胎肝干細(xì)胞凋亡的抑制作用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):492132
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