本文關(guān)鍵詞：抗凍蛋白TmAFP84在畢赤酵母中的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的通過對黃粉甲抗凍蛋白TmAFP84進(jìn)行基因克隆、表達(dá),獲得目的蛋白。方法 PCR擴(kuò)增目的 afp84基因,克隆到pUCm-T載體中測序并保存。通過雙酶切將afp84基因定向重組到畢赤酵母表達(dá)載體pPIC9K中。醋酸鋰轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入畢赤酵母GS115,篩選出重組菌株。用0.5%甲醇誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá),通過聚丙烯酰胺凝膠電泳和海波銀染鑒定目的蛋白。結(jié)果經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得了目的基因片段afp84,克隆質(zhì)粒pUCm-T與afp84重組獲得了質(zhì)粒pUCm-T-afp84。構(gòu)建成功真核表達(dá)載體pPIC9K-afp84,目的抗凍蛋白TmAFP84經(jīng)誘導(dǎo)后獲得表達(dá)。結(jié)論真核表達(dá)載體pPIC9K-afp84成功構(gòu)建,并大量表達(dá)出目的抗凍蛋白,為擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模及深入研究抗凍蛋白的性質(zhì)和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 南方醫(yī)科大學(xué)附屬鄭州人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 抗凍蛋白 真菌表達(dá) 畢赤酵母
【分類號】：R392.1
【正文快照】： 近年來,抗凍蛋白(antifreeze proteins,AFPs)的基礎(chǔ)研究及其在生物技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域的研究已經(jīng)成為目前國際上一個比較熱門的研究方向。Gabriel[1]等首次報道了在老鼠的心臟移植中,用抗凍蛋白低溫保藏心臟從而成功地保護(hù)了心肌結(jié)構(gòu)。以色列研究人員利用抗凍蛋白對哺乳動物的心臟

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王艷;邱立明;代春英;王晶;張富春;馬紀(jì);;昆蟲抗凍蛋白MpAFP149抗血清的制備及轉(zhuǎn)基因煙草免疫定位的檢測[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年11期

2 盧存福,王紅,簡令成,匡廷云;植物抗凍蛋白研究進(jìn)展[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1998年03期

3 王明元,居頌光,居頌文,狄文英,周曉華,薛群,曲靜,方振羊,張學(xué)光;AC133-2分子的克隆及其逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體的構(gòu)建[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2005年01期

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  本文關(guān)鍵詞：抗凍蛋白TmAFP84在畢赤酵母中的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：486615