發(fā)布時間：2017-06-25 16:12

  本文關(guān)鍵詞：Neuralized siRNA表達載體的構(gòu)建及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建Neuralized siRNA干擾載體并觀察其對細胞中Neuralized表達水平的影響。方法化學(xué)合成靶向Neuralized的短發(fā)夾寡核苷酸序列,與線性化pGPU6/Neo質(zhì)粒退火連接。酶切后測序鑒定正確,轉(zhuǎn)染入HEK293細胞。利用Western blot和間接免疫熒光技術(shù)分析Neuralized siRNA載體對細胞中Neuralized表達及其定位的影響。結(jié)果 Neuralized siRNA干擾載體經(jīng)酶切及測序分析表明,目的核苷酸序列成功插入預(yù)計位點且序列正確;Neuralized siRNA干擾載體轉(zhuǎn)染HEK293細胞后,Western blot檢測顯示,Neuralized siRNA干擾載體明顯降低細胞中Neuralized蛋白表達;間接免疫熒光顯示,轉(zhuǎn)染4種Neuralized siRNA均能使定位于細胞膜上的Nneuralized蛋白的熒光強度變暗。結(jié)論 Neuralized siRNA干擾載體成功構(gòu)建,且能明顯抑制細胞中Neuralized的表達。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院新疆地方與民族高發(fā)病教育部重點實驗室生物化學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： Neuralized SiRNA干擾
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31060136)
【分類號】：R346
【正文快照】： Jagged1/Notch信號通路在動物進化過程中高度保守,其可以通過多種機制調(diào)節(jié)細胞的分化、增殖及凋亡過程,調(diào)控多種組織器官的正常生長發(fā)育。因此,Notch信號通路活性的改變及其受體和配體的表達失調(diào)可導(dǎo)致多種疾病包括腫瘤的發(fā)生,尤其在調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中發(fā)揮著重要的作用[1-4]

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李祥蘇;吳叔明;;Jagged1/Notch在消化道腫瘤及其血管形成中的作用[J];國際消化病雜志;2011年01期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉鋒;呂世剛;祝新根;;Notch信號通路與腫瘤血管新生[J];中國微侵襲神經(jīng)外科雜志;2011年10期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭仕杰;于洋;單偉;鄭德宇;秦書儉;包翠芬;;siRNA沉默HLA-A2表達的hMSCs對人異體T淋巴細胞分泌IFN-γ和IL-2功能的影響[J];解剖科學(xué)進展;2011年02期

2 李海霞;韓晶晶;張云;張振中;;靶向hTERT的特異性siRNA抑制SMMC-7721肝癌細胞增殖機制研究[J];中國藥理學(xué)通報;2011年05期

3 鐘晨;黃瑾;;泛素連接酶對Notch信號途徑的調(diào)節(jié)作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展;2011年20期

4 ;[J];;年期

5 ;[J];;年期

6 ;[J];;年期

7 ;[J];;年期

8 ;[J];;年期

9 ;[J];;年期

10 ;[J];;年期

  本文關(guān)鍵詞：Neuralized siRNA表達載體的構(gòu)建及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：482745