本文關(guān)鍵詞：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離鑒定及向血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程中microRNA126的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及將其定向誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells,EDCs)的方法,并通過(guò)觀察microRNA126的表達(dá)規(guī)律初步探索其在定向分化中的調(diào)控作用。方法通過(guò)反復(fù)貼壁及人工分選方法進(jìn)行大鼠骨髓MSCs的體外分離純化及擴(kuò)增,運(yùn)用免疫熒光法檢測(cè)MSCs中CD34、CD105和CD73的表達(dá)。應(yīng)用MEF誘導(dǎo)分化培養(yǎng)液將MSCs定向誘導(dǎo)分化為EDCs,采用qRT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞誘導(dǎo)分化過(guò)程不同時(shí)間點(diǎn)EDCs特征基因CD34、血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VE-cadherin)及調(diào)控小RNA分子microRNA126的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)分離純化的骨髓MSCs CD34呈陰性表達(dá),CD105呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),CD73呈陽(yáng)性表達(dá),證實(shí)骨髓MSCs分離成功,且細(xì)胞均一性較好,占細(xì)胞總數(shù)的90%以上。MSCs定向誘導(dǎo)為EDCs早期分化過(guò)程中,在誘導(dǎo)前期第1~4天,VE-cadherin和CD34基因呈陰性表達(dá);第5~6天VE-cadherin和CD34表達(dá)顯著;第7~9天,VE-cadherin呈持續(xù)陽(yáng)性表達(dá),而CD34于第7天下降,第8~9天又呈陽(yáng)性表達(dá)。microRNA126在分化過(guò)程中的表達(dá)趨勢(shì)與CD34一致。結(jié)論成功建立了骨髓MSCs的分離方法及定向誘導(dǎo)分化為EDCs的方法;microRNA126在MSCs向EDCs的定向分化過(guò)程中可能起一定的調(diào)控作用。
【作者單位】： 第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院心血管內(nèi)科;生物芯片上海國(guó)家工程研究中心;上海伯豪生物技術(shù)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： 骨髓 間充質(zhì)干細(xì)胞 內(nèi)皮細(xì)胞 細(xì)胞分化 microRNA
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞是來(lái)源于早期中胚層的一類多能干細(xì)胞,理論上可分化為所有中胚層來(lái)源的細(xì)胞。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)不僅可分泌多種促進(jìn)血管生長(zhǎng)因子,且由于內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial cells,EDCs)屬于中胚層,是胚胎發(fā)育過(guò)程中第1個(gè)分化的組織,因此具有分化為

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本文編號(hào)：482060