發(fā)布時(shí)間：2017-06-24 21:21

  本文關(guān)鍵詞：干擾SREBP-1c對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)下L02和HepG2肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的構(gòu)建SREBP-1c基因的miRNA真核表達(dá)載體,觀察其對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)下L02和HepG2肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積的影響。方法設(shè)計(jì)并構(gòu)建SREBP-1c基因的3個(gè)miRNA干擾載體,經(jīng)測(cè)序鑒定miRNA載體構(gòu)建成功后轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞,熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白表達(dá)。Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后SREBP-1c的表達(dá);甘油三酯測(cè)定和油紅O染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)沉積;Western blot檢測(cè)SREBP-1c下游脂代謝相關(guān)基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)和乙酰輔酶A羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC1)的表達(dá)。結(jié)果靶向干擾SREBP-1c的miRNA真核表達(dá)載體構(gòu)建成功。Westernblot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染SREBP-1c-1miRNA和SREBP-1c-3miRNA載體后,L02和HepG2細(xì)胞內(nèi)SREBP-1c蛋白水平表達(dá)均明顯減低(P0.05),SREBP-1c-1miRNA的干擾效果最好(P0.05)。與對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染SREBP-1c-1miRNA載體后L02和HepG2肝細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量均明顯降低(P0.05),細(xì)胞內(nèi)脂滴明顯減少;FAS和ACC1蛋白的表達(dá)明顯降低(P0.05)。結(jié)論 SREBP-1c基因沉默通過FAS/ACC1降低了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)下肝細(xì)胞脂質(zhì)合成。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院消化內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 非酒精性脂肪肝 SREBP-c FAS 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 RNA干擾
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金(81000357)~~
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liverdisease,NAFLD)是近年來發(fā)現(xiàn)的與肥胖相關(guān)的代謝紊亂性疾病在肝臟的表現(xiàn),以肝細(xì)胞脂肪變性為特征。NAFLD是導(dǎo)致慢性肝酶升高和隱源性肝硬化的最常見原因[1-2]。肝細(xì)胞有豐富的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),非酒精性脂肪肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)處于應(yīng)激狀態(tài);相反,

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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本文編號(hào)：479599