端粒酶是合成端粒DNA,維持端粒長度和基因組穩(wěn)定性的逆轉錄酶,與細胞衰老和腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關。端粒酶的活性調節(jié)及功能機制尚未闡明。Hippo信號通路的核心部分是由蛋白激酶MST1/2、LATS1/2組成的激酶鏈,該激酶鏈磷酸化并抑制轉錄共激活因子YAP和TAZ,從而調控基因表達,并在器官大小調控、組織再生、腫瘤發(fā)生發(fā)展等過程中發(fā)揮重要作用。近期研究發(fā)現,溶血磷脂酸LPA可以抑制Hippo通路的激酶LATS1/2,促進YAP的激活。本實驗室早期研究發(fā)現LPA可以誘導端粒酶催化亞基hTERT的表達及端粒酶活性,但其機制并未深入研究。這提示了Hippo信號通路可能參與hTERT的調控。我們研究發(fā)現,當用LPA處理細胞,Hippo信號通路受到抑制使YAP去磷酸化入核時,hTERT mRNA和蛋白的表達水平升高。轉染YAP激活型突變體以及敲除YAP上游激酶LATS1/2,都可以提高hTERT mRNA和蛋白的表達。反之,在LATS1/2敲除的細胞系中敲低YAP,hTERT表達水平降低。我們通過熒光素酶報告基因實驗表明,YAP與轉錄因子TEAD的結合可以激活hTERT的啟動子活性,同時確定了其潛在...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1多個轉錄因子及組蛋白修飾促進與抑制hTERT轉錄

圖2Hippo信號通路受多種信號調節(jié)[68]

杭州師范大學碩士學位論文緒論變細胞張力來調節(jié)Hippo途徑；頂端和基底外側血影蛋白網絡均可作為Hippo通路調節(jié)中機械信號的傳感器；（3）可溶性因子。尤其是GPCR配體，可能通過RhoGTPases和肌動蛋白動力學調節(jié)LATS1/2；（4）代謝狀態(tài)。如細胞能量....

圖3.1，抑制Hippo信號通路促進hTERT轉錄調控

24圖3.1，抑制Hippo信號通路促進hTERT轉錄調控。（A）用FBS和LPA處理血清饑餓12h的293A，免疫熒光觀察YAP的入核情況，熒光定量PCR檢測hTERTmRNA的表達水平。（B）293A血清饑餓12h，10%FBS處理0.5....

圖3.2，YAP可以調控hTERT的表達

26圖3.2，YAP可以調控hTERT的表達。（A-D）在HeLa、MCF7、293T細胞中過表達野生型YAP，持續(xù)激活型YAP-5SA，用q-PCR和免疫印跡方法檢測hTERTmRNA與蛋白表達水平。（E，F）在293ALATS1/2KO的細胞系，....

本文編號：4025675