端粒酶是合成端粒DNA,維持端粒長(zhǎng)度和基因組穩(wěn)定性的逆轉(zhuǎn)錄酶,與細(xì)胞衰老和腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。端粒酶的活性調(diào)節(jié)及功能機(jī)制尚未闡明。Hippo信號(hào)通路的核心部分是由蛋白激酶MST1/2、LATS1/2組成的激酶鏈,該激酶鏈磷酸化并抑制轉(zhuǎn)錄共激活因子YAP和TAZ,從而調(diào)控基因表達(dá),并在器官大小調(diào)控、組織再生、腫瘤發(fā)生發(fā)展等過(guò)程中發(fā)揮重要作用。近期研究發(fā)現(xiàn),溶血磷脂酸LPA可以抑制Hippo通路的激酶LATS1/2,促進(jìn)YAP的激活。本實(shí)驗(yàn)室早期研究發(fā)現(xiàn)LPA可以誘導(dǎo)端粒酶催化亞基hTERT的表達(dá)及端粒酶活性,但其機(jī)制并未深入研究。這提示了Hippo信號(hào)通路可能參與hTERT的調(diào)控。我們研究發(fā)現(xiàn),當(dāng)用LPA處理細(xì)胞,Hippo信號(hào)通路受到抑制使YAP去磷酸化入核時(shí),hTERT mRNA和蛋白的表達(dá)水平升高。轉(zhuǎn)染YAP激活型突變體以及敲除YAP上游激酶LATS1/2,都可以提高h(yuǎn)TERT mRNA和蛋白的表達(dá)。反之,在LATS1/2敲除的細(xì)胞系中敲低YAP,hTERT表達(dá)水平降低。我們通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)表明,YAP與轉(zhuǎn)錄因子TEAD的結(jié)合可以激活hTERT的啟動(dòng)子活性,同時(shí)確定了其潛在...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子及組蛋白修飾促進(jìn)與抑制hTERT轉(zhuǎn)錄

圖2Hippo信號(hào)通路受多種信號(hào)調(diào)節(jié)[68]

杭州師范大學(xué)碩士學(xué)位論文緒論變細(xì)胞張力來(lái)調(diào)節(jié)Hippo途徑；頂端和基底外側(cè)血影蛋白網(wǎng)絡(luò)均可作為Hippo通路調(diào)節(jié)中機(jī)械信號(hào)的傳感器；（3）可溶性因子。尤其是GPCR配體，可能通過(guò)RhoGTPases和肌動(dòng)蛋白動(dòng)力學(xué)調(diào)節(jié)LATS1/2；（4）代謝狀態(tài)。如細(xì)胞能量....

圖3.1，抑制Hippo信號(hào)通路促進(jìn)hTERT轉(zhuǎn)錄調(diào)控

24圖3.1，抑制Hippo信號(hào)通路促進(jìn)hTERT轉(zhuǎn)錄調(diào)控。（A）用FBS和LPA處理血清饑餓12h的293A，免疫熒光觀察YAP的入核情況，熒光定量PCR檢測(cè)hTERTmRNA的表達(dá)水平。（B）293A血清饑餓12h，10%FBS處理0.5....

圖3.2，YAP可以調(diào)控hTERT的表達(dá)

26圖3.2，YAP可以調(diào)控hTERT的表達(dá)。（A-D）在HeLa、MCF7、293T細(xì)胞中過(guò)表達(dá)野生型YAP，持續(xù)激活型YAP-5SA，用q-PCR和免疫印跡方法檢測(cè)hTERTmRNA與蛋白表達(dá)水平。（E，F(xiàn)）在293ALATS1/2KO的細(xì)胞系，....

本文編號(hào)：4025675