血小板源性生長(zhǎng)因子/蛋白激酶B通路在壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心室重構(gòu)中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2024-06-01 13:38
目的:分析血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)/蛋白激酶B(AKT)通路在壓力超負(fù)荷誘導(dǎo)的心室重構(gòu)中的作用及機(jī)制。方法:選取C57BL/6雌性小鼠55只,建立主動(dòng)脈弓縮窄模型,成功建模45只,小鼠隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組、DMSO組和實(shí)驗(yàn)組,假手術(shù)組小鼠開(kāi)胸后逐層縫合,不進(jìn)行主動(dòng)脈縮窄術(shù)(TAC),開(kāi)胸24 h后給予PBS溶液200μL加DMSO 50μL,DMSO組TAC術(shù)后24 h給予PBS溶液200μL加DMSO 50μL,實(shí)驗(yàn)組TAC術(shù)后24 h給予PBS溶液200μL加抑制劑AG1296 50μL,觀察小鼠心功能及心肌組織病理形態(tài)。慢病毒感染建立PDGF基因不同表達(dá)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)細(xì)胞鑒定和培養(yǎng),依據(jù)細(xì)胞不同處理方式分為對(duì)照組、PDGF組、shRNA組和PDGF+IMA組,檢測(cè)p-AKT及t-AKT蛋白在HUVEC細(xì)胞內(nèi)表達(dá)情況。結(jié)果:DMSO組小鼠左室收縮末期容積(LVESV)、左室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVESD)及左室舒張末期內(nèi)徑(LVEDD)較假手術(shù)組升高,左室射血分?jǐn)?shù)(EF)、左室短軸縮短率(FS)較假手術(shù)組降低。實(shí)驗(yàn)組LVESV、L...
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)小鼠
1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞與試劑
1.3 研究方法
1.3.1 建立小鼠主動(dòng)脈弓縮窄模型
1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥
1.4 觀察指標(biāo)
1.4.1 心功能指標(biāo)檢測(cè)
1.4.2 組織切片染色
1.4.3 小鼠心肌組織麥胚凝集素(WGA)免疫熒光染色
1.4.4 慢病毒感染建立PDGF基因不同表達(dá)HUVEC細(xì)胞鑒定和培養(yǎng)
1.4.5 Western blot檢測(cè)
1.4.6 H9C2心肌細(xì)胞骨架染色
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 各組小鼠心臟超聲檢測(cè)情況
2.2 各組小鼠心肌組織染色情況
2.3 各組小鼠心肌細(xì)胞橫截面積及WGA免疫熒光染色情況
2.4 各組細(xì)胞內(nèi)p-AKT及t-AKT蛋白表達(dá)情況
2.5 血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)PDGF激活改善H9C2心肌細(xì)胞肥大
3 討論
本文編號(hào):3985972
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【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)小鼠
1.2 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞與試劑
1.3 研究方法
1.3.1 建立小鼠主動(dòng)脈弓縮窄模型
1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組及給藥
1.4 觀察指標(biāo)
1.4.1 心功能指標(biāo)檢測(cè)
1.4.2 組織切片染色
1.4.3 小鼠心肌組織麥胚凝集素(WGA)免疫熒光染色
1.4.4 慢病毒感染建立PDGF基因不同表達(dá)HUVEC細(xì)胞鑒定和培養(yǎng)
1.4.5 Western blot檢測(cè)
1.4.6 H9C2心肌細(xì)胞骨架染色
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 各組小鼠心臟超聲檢測(cè)情況
2.2 各組小鼠心肌組織染色情況
2.3 各組小鼠心肌細(xì)胞橫截面積及WGA免疫熒光染色情況
2.4 各組細(xì)胞內(nèi)p-AKT及t-AKT蛋白表達(dá)情況
2.5 血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)PDGF激活改善H9C2心肌細(xì)胞肥大
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