目的本研究旨在探討鈣同線蛋白-1(Calsyntenin-1,CLSTN1)在脆性X綜合癥(Fragile X Syndrome,FXS)小鼠的海馬依賴性記憶缺陷中發(fā)揮的作用,以及在海馬齒狀回中過表達(dá)CLSTN1對Fmr1 KO小鼠神經(jīng)元的樹突棘結(jié)構(gòu)、突觸連接強(qiáng)度,以及海馬突觸可塑性的影響。方法本研究分別采用Fmr1基因敲除小鼠(FVB.129P2-Pde6b+Tyrc-ch Fmr1tm1Cgr/J)(Fmr1 KO)和野生型小鼠(FVB.129P2-Pde6b+Tyrc-ch/Ant J)(WT)作為FXS的實(shí)驗(yàn)及對照模型,首先,采用蛋白免疫印跡法,檢測Fmr1基因敲除小鼠中CLSTN1蛋白的表達(dá)水平。其次,在正常小鼠海馬齒狀回中,利用病毒載體干擾CLSTN1的表達(dá)檢測小鼠空間記憶、恐懼記憶及社交記憶,與其焦慮和運(yùn)動水平。然后,在Fmr1基因敲除小鼠海馬齒狀回中,利用病毒載體過表達(dá)CLSTN1檢測其空間記憶、恐懼記憶及社交記憶,與其焦慮和運(yùn)動水平。之后,利用病毒介導(dǎo)的神經(jīng)元精細(xì)形態(tài)標(biāo)記技術(shù),檢測在Fmr1基因敲除小鼠海馬齒狀回中過表達(dá)CLSTN1對顆粒細(xì)胞的樹突棘結(jié)構(gòu)的影響。進(jìn)一步...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3.1兩月齡Fmr1KO小鼠的CLSTN1蛋白表達(dá)水平降低Figure3.1TheexpressionofCLSTN1proteinwasdecreasedintwo-montholdFmr1KOmice.

3.1海馬CLSTN1表達(dá)異常與Fmr1KO小鼠海馬依賴的記憶受損有關(guān)3.1.1兩月齡Fmr1KO小鼠海馬區(qū)的CLSTN1蛋白表達(dá)量下降Fmr1KO小鼠存在海馬依賴記憶的異常[12,13]，為了確定Fmr1KO小鼠海馬區(qū)的CLSTN1蛋白表....

圖3.2在WT小鼠海馬齒狀回中注射干擾CLSTN1病毒，三周后CLSTN1蛋白表達(dá)下降Figure3.2CLSTN1downregulationthreeweeksafterinjectionofrecombinantCLSTN1

為了探討海馬區(qū)CLSTN1的表達(dá)水平降低是否的確與小鼠的海馬依賴記憶受損有關(guān)，我們利用腺相關(guān)病毒及shRNA干擾技術(shù)，下調(diào)WT小鼠海馬齒狀回中的CLSTN1表達(dá)水平。在兩月齡的WT小鼠海馬齒狀回中，注射干擾CLSTN1病毒[rAAV-U6-shRNA(CLS....

圖3.4在Morris水迷宮測試中，注射實(shí)驗(yàn)并不影響WT小鼠的空間記憶

圖3.4在Morris水迷宮測試中，注射實(shí)驗(yàn)并不影響WT小鼠的空間記憶。Figure3.4InjectionexperimentdidnotaffectspatialmemoryinWTmiceintheMorriswatermazet....

圖3.5干擾CLSTN1降低WT小鼠的恐懼記憶Figure3.5DownregulationofCLSTN1reducedfearmemoryofWTmice.A.Theschema

在情境依賴性的恐懼學(xué)習(xí)記憶中WT+CLSTN1shRNA小鼠的Freezing水平顯著降低（p<0.01，圖3.5C）。兩小時后，改變環(huán)境，在線索（聲音）依賴性的恐懼學(xué)習(xí)記憶中WT+CLSTN1shRNA小鼠的Freezing水平相對WT+CLSTN1C....

本文編號：3976117