目的探討α-硫辛酸對青光眼模型大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(RGC)的保護作用及其機制。方法選取SPF級雄性SD大鼠60只,取30只大鼠,選右眼為實驗眼,采用烙閉表層鞏膜靜脈的方法制作大鼠青光眼模型。將造模成功的大鼠隨機分為兩組:青光眼對照組和青光眼硫辛酸組,每組各15眼。另取30只大鼠,右眼行假手術操作,術后隨機分為兩組:正常眼壓對照組和正常眼壓硫辛酸組,每組各15眼。于造模第3周末,正常眼壓硫辛酸組和青光眼硫辛酸組大鼠腹腔注射α-硫辛酸150 mg·kg^-1。分別于造模前、造模后第1周末、第2周末、第3周末、第4周末、第5周末、第6周末應用手持式眼壓計測量并記錄大鼠雙眼眼壓。分別用相應測試盒檢測丙二醛(MDA)和活性氧簇(ROS)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。通過TUNEL法檢測RGC凋亡情況,通過免疫組織化學法檢測視網(wǎng)膜Caspase-3蛋白表達情況。應用GraphPadPrism6軟件作圖,采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件分析所有數(shù)據(jù)。結果造模后3周末開始腹腔注射α-硫辛酸,青光眼硫辛酸組大鼠右眼眼壓在造模后4周、5周、6周...

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圖1表層鞏膜靜脈及烙閉操作示意圖

通過腹膜內注射氯胺酮(25mg·kg-1)和甲苯噻嗪(10mg·kg-1)混合物輕微麻醉大鼠。局部應用5g·L-1丙美卡因滴眼液進行局部麻醉。手術步驟:(1)在角膜緣后,切開球結膜,分離結膜下筋膜;(2)完全暴露鞏膜上靜脈,游離并抬起靜脈總支;(3)夾閉并燒灼角鞏膜遠側靜脈....

圖2四組大鼠不同時間點右眼眼壓變化

四組間RGC凋亡指數(shù)比較差異有統(tǒng)計學意義(F=18.383,P<0.05)。正常眼壓硫辛酸組RGC凋亡指數(shù)和正常眼壓對照組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),但均小于青光眼硫辛酸組和青光眼對照組(均為P<0.05);青光眼硫辛酸組RGC凋亡指數(shù)小于青光眼對照組(P<0.05)。....

圖3顯微鏡下顯示四組RGC層均觀察到凋亡細胞(×200)

表1四組大鼠血清MDA、ROS含量以及GSH-Px及SOD酶活性比較組別眼數(shù)MDA/mmol·L-1ROS/U·mL-1GSH-Px/U·mL-1SOD/U·mL-1正常眼壓硫辛酸組153.44±0.31322.38±61.788.07±1.311....

圖4顯微鏡下顯示四組RGC層均可見Caspase-3蛋白陽性表達(×200)

四組RGC層均可見Caspase-3蛋白表達。青光眼硫辛酸組和青光眼對照組Caspase-3蛋白表達均明顯高于正常眼壓硫辛酸組和正常眼壓對照組。見圖4。2.4.2各組視網(wǎng)膜Caspase-3蛋白平均光密度值

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