目的系統(tǒng)檢測人絨毛外滋養(yǎng)細胞HTR-8/SVneo中Toll樣受體(TLR)mRNA的表達情況,定量分析TLRs配體刺激前后吲哚胺2,3雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表達差異。方法 RT-PCR檢測HTR-8/SVneo細胞中TLR 1-10mRNA的表達情況;實時熒光定量RT-PCR檢測TLR3、TLR4、TLR7/8、TLR9配體刺激前后IDO mRNA表達水平。結(jié)果 HTR-8/SVneo細胞中有IDO及TLR 1-10 mRNA表達;在48 h內(nèi)IDO mRNA表達隨著時間延長,呈升高趨勢;IDO mRNA的表達與培養(yǎng)基營養(yǎng)狀況相關(guān);TLRs配體刺激后,除TLR-3轉(zhuǎn)錄水平表達下調(diào)外,TLR-4、7、8、9 mRNA表達均上調(diào);poly(I∶C)刺激后IDO mRNA表達低于正常組,IFN-γ刺激后表達高于正常組(P<0.05)。結(jié)論 TLRs mRNA的表達提示該細胞具有抗感染作用;HTR-8/Svneo細胞中IDO mRNA的表達與母胎界面營養(yǎng)狀況相關(guān);TLRs配體刺激劑對TLRs及IDO mRNA表達的影響不僅驗...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 細胞來源與培養(yǎng)
    1.2 細胞總RNA提取
    1.3 RT-PCR引物及反應(yīng)體系條件
    1.4 IDO基因RNA標準品制備
    1.5 TLRs配體及IFN-γ刺激實驗
    1.6 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 HTR-8/SVneo細胞中TLRs m RNA的表達
    2.2 HTR-8/SVneo細胞中IDO m RNA的表達
    2.3 HTR-8/SVneo細胞經(jīng)TLRs配體刺激后對應(yīng)TLRs m RNA表達
    2.4 HTR-8/SVneo細胞經(jīng)TLRs配體刺激后IDO m RNA表達差異
3 討論



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