發(fā)布時間：2024-02-03 20:53

　　目的探討TRAB結(jié)構(gòu)域包含蛋白2B (TRABD2B)對人類免疫缺陷病毒(HIV)復(fù)制的影響。方法實時PCR檢測人原代細(xì)胞和細(xì)胞系中TRABD2B mRNA的表達(dá)水平;人TRABD2B表達(dá)質(zhì)粒p TRABD2B-GFP轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞并通過熒光顯微鏡觀察TRABD2B在293T細(xì)胞中的定位。采用小干擾RNA (siRNA)下調(diào)293T細(xì)胞中TRABD2B的表達(dá),24 h后感染p24為10 ng的HIV-1_NL4-3-Luc (VSVG)假病毒并檢測胞內(nèi)熒光素酶活性。在293T細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染人TRABD2B表達(dá)質(zhì)粒以及HIV-1_NL4-3、HIV-2st和SIV_mac239病毒質(zhì)粒,或共轉(zhuǎn)染不同種屬TRABD2B表達(dá)質(zhì)粒和HIV-1_NL4-3病毒質(zhì)粒,48 h后收集上清感染TZM-bl細(xì)胞,檢測TZM-bl細(xì)胞中的熒光素酶活性。結(jié)果人TRABD2B主要表達(dá)于293T細(xì)胞,且主要分布在293T細(xì)胞的胞膜;siRNA敲減293T細(xì)胞中內(nèi)源性TRABD2B的表達(dá)能夠促進(jìn)HIV-1_NL4-3

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圖1TRABD2B在細(xì)胞中的定位×100

實時PCR結(jié)果顯示，293T細(xì)胞中TRABD2BmRNA表達(dá)水平高于CD4+T細(xì)胞、單核細(xì)胞和MDM細(xì)胞，差異有統(tǒng)計學(xué)意義[CD4+T細(xì)胞（0.09±0.07），單核細(xì)胞（0.10±0.07),MDM(0.27±0.04),293T細(xì)胞（5.38±1.05），均P<0.001....

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