TRAB結構域包含蛋白2B在人類免疫缺陷病毒復制中的作用
發(fā)布時間:2024-02-03 20:53
目的探討TRAB結構域包含蛋白2B (TRABD2B)對人類免疫缺陷病毒(HIV)復制的影響。方法實時PCR檢測人原代細胞和細胞系中TRABD2B mRNA的表達水平;人TRABD2B表達質(zhì)粒p TRABD2B-GFP轉染293T細胞并通過熒光顯微鏡觀察TRABD2B在293T細胞中的定位。采用小干擾RNA (siRNA)下調(diào)293T細胞中TRABD2B的表達,24 h后感染p24為10 ng的HIV-1NL4-3-Luc (VSVG)假病毒并檢測胞內(nèi)熒光素酶活性。在293T細胞中共轉染人TRABD2B表達質(zhì)粒以及HIV-1NL4-3、HIV-2st和SIVmac239病毒質(zhì)粒,或共轉染不同種屬TRABD2B表達質(zhì)粒和HIV-1NL4-3病毒質(zhì)粒,48 h后收集上清感染TZM-bl細胞,檢測TZM-bl細胞中的熒光素酶活性。結果人TRABD2B主要表達于293T細胞,且主要分布在293T細胞的胞膜;siRNA敲減293T細胞中內(nèi)源性TRABD2B的表達能夠促進HIV-1NL4-3
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本文編號:3894661
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圖1TRABD2B在細胞中的定位×100
實時PCR結果顯示,293T細胞中TRABD2BmRNA表達水平高于CD4+T細胞、單核細胞和MDM細胞,差異有統(tǒng)計學意義[CD4+T細胞(0.09±0.07),單核細胞(0.10±0.07),MDM(0.27±0.04),293T細胞(5.38±1.05),均P<0.001....
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