轉(zhuǎn)錄因子ZNF148屬于Krüppel型(Cys2-His2-type)鋅指家族,由794個氨基酸組成。ZNF148對轉(zhuǎn)錄具有雙重作用,可以作為激活因子或抑制因子調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。ZNF148在人類疾病,尤其是癌癥中可能發(fā)揮重要作用。然而,ZNF48調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的分子機(jī)制及其在發(fā)育中的作用目前尚未明確。研究表明ZNF148的同源物ZFP281對于維持小鼠胚胎干細(xì)胞(mESC)多能性是必需的。因在本篇研究中,我們將利用小鼠胚胎干細(xì)胞為模型,并結(jié)合生化及基因組學(xué)手段探究ZNF148在mESC自我更新及多向分化潛能中的作用及分子機(jī)制。為了尋找ZNF148相互作用的蛋白,我們實(shí)驗(yàn)室純化了ZNF148蛋白進(jìn)行質(zhì)譜分析發(fā)現(xiàn)了NuRD復(fù)合物。我們利用內(nèi)源性免疫沉淀驗(yàn)證了ZNF148與核小體重構(gòu)和脫乙�；鶑�(fù)合物(NuRD)的相互作用。通過構(gòu)建ZNF148截短蛋白證明了其N端1-160aa對于ZNF148和MBD3的相互作用是必要的,而ZNF148與CHD4的相互作用則依賴于ZNF148的528-600aa。為了研究Znf148在mESC中的功能,我們構(gòu)建了Znf148敲除細(xì)胞系。ZNF148染色質(zhì)免疫共沉...

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【學(xué)位級別】：碩士

圖1-3-1：模型說明Zfp281，SOX2，OCT4和NANOG對NANOG啟動子的占有率

圖1-4-1:ZNF148結(jié)構(gòu)示意圖(Zhangetal.,2010)

圖1-8-1：ZNF148功能介紹圖(Zhangetal.,2010)

圖3-2-1：NuRD復(fù)合物的結(jié)構(gòu)示意圖(Torchyetal.,2015)

本文編號：3886513