目的:探討細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)信號(hào)通路在胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)誘導(dǎo)新生小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化中的作用。方法:取新生C57BL/6J小鼠海馬體外分離、培養(yǎng)NSCs,分別加入終濃度100 ng/ml的IGF-1和20μmol/L的抑制劑U0126。CCK-8試劑盒檢測(cè)IGF-1對(duì)NSCs增殖的影響;免疫熒光細(xì)胞染色法檢測(cè)IGF-1對(duì)細(xì)胞分化的影響;Western blot檢測(cè)ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表達(dá),并對(duì)各組進(jìn)行比較。結(jié)果:CCK-8測(cè)定細(xì)胞增殖,第3 d U0126組相對(duì)OD值顯著低于IGF-1組,第7 d時(shí)IGF-1組OD值則顯著高于對(duì)照組和U0126組(P<0.05)。倒置熒光顯微鏡下可觀察到IGF-1組βⅢTubulin和GFAP陽(yáng)性分化率均明顯高于對(duì)照組和U0126組(P<0.05)。Western blot結(jié)果顯示:IGF-1組蛋白表達(dá)量顯著高于對(duì)照組和U0126組(P<0.05),IGF-1促進(jìn)ERK磷酸化...

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【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 NSCs的分離培養(yǎng)和鑒定
        2.2 CCK-8試劑盒檢測(cè)
        2.3 GFAP/βⅢTubulin免疫熒光雙標(biāo)和DAPI核染
        2.4 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)和Western blot檢測(cè)ERK1/2 磷酸化水平
結(jié)果
    1 NSCs體外培養(yǎng)、鑒定
    2 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖結(jié)果
    3 細(xì)胞分化情況
    4 p-ERK1/2的免疫細(xì)胞熒光和蛋白表達(dá)情況
討論



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