目的:探究1,4,5-三磷酸肌醇受體(IP₃R)在促黃體素-表皮生長因子受體(LH-EGFR)信號(hào)誘導(dǎo)卵母細(xì)胞第一次減數(shù)分裂恢復(fù)中的作用及機(jī)制。方法:構(gòu)建小鼠卵丘-卵母細(xì)胞復(fù)合物(COCs)體外培養(yǎng)模型以及卵泡培養(yǎng)模型,研究IP₃R特異性抑制劑2-氨乙基二苯基硼酸脂(2-APB)及heparin對(duì)LH/EGF誘導(dǎo)減數(shù)分裂恢復(fù)以及EGF誘導(dǎo)卵丘擴(kuò)展的影響,利用real-time PCR技術(shù)檢測卵丘擴(kuò)展因子的表達(dá),鈣離子熒光探針Fluo 3-AM檢測胞內(nèi)鈣離子水平變化,酶聯(lián)免疫法檢測胞內(nèi)cGMP水平變化。結(jié)果:IP₃R抑制劑2-APB和heparin能夠有效抑制EGF誘導(dǎo)的減數(shù)分裂恢復(fù)(P<0.05),同時(shí)顯著降低了COCs內(nèi)cGMP的含量(P<0.05);2-APB和Heparin還能夠抑制EGF誘導(dǎo)的卵丘擴(kuò)展,同時(shí)顯著降低卵丘擴(kuò)展因子的mRNA表達(dá)水平(P<0.05);激活I(lǐng)P₃R可升高細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平,而2-APB及heparin能夠有效降低EGF升高的卵丘細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平(P&...

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 COCs的分離及培養(yǎng)
        3.2 卵泡的分離及培養(yǎng)
        3.3 卵丘擴(kuò)展
        3.4 RNA的提取
        3.5 real-time PCR
        3.6 細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平檢測
        3.7 cGMP水平檢測
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 IP3R抑制劑2-APB和heparin抑制EGF誘導(dǎo)的卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)
    2 IP3R抑制劑2-APB和heparin抑制EGF誘導(dǎo)的卵丘擴(kuò)展
    3 IP3R抑制劑2-APB和heparin抑制EGF誘導(dǎo)的卵丘細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平升高
    4 IP3R抑制劑2-APB和heparin對(duì)COCs中cGMP水平的影響
    5 IP3R抑制劑2-APB和heparin抑制LH誘導(dǎo)的卵母細(xì)胞減數(shù)分裂恢復(fù)
討 論



本文編號(hào)：3850781