發(fā)布時間：2023-05-28 07:29

　　為探討能否通過小干擾RNA(small interference RNA,siRNA)干擾影響巨噬細胞Fcγ受體介導(dǎo)的吞噬作用,采用FCGRⅡA siRNA轉(zhuǎn)染佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)活化人單核細胞THP-1,并設(shè)NO-TARGET、GAPDH、no-siRNA(1640)為對照。培養(yǎng)48～72h后,用FCM分析CD14+細胞的CD32、CD32b分布,用CD14的平均熒光強度(mean fluorescence intensity,MFI)值作為內(nèi)參,得到CD32、CD32b相對MFI值;用Western blotting觀察CD32a、CD32b的蛋白表達水平;進行單核細胞單層實驗(monocyte monolayer assay,MMA),結(jié)合流式細胞術(shù)分析THP-1中能吞噬調(diào)理紅細胞的吞噬百分比。采用配對t檢驗分析FCGRⅡA組與各對照組間的分布差異。Western blotting結(jié)果證實,FCGRⅡA組CD32a量明顯減少(分別為NO-TARGET組、GAPDH組、1640組的22%、42%、31%),而CD32b不降...

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料與儀器
    1.2 THP-1培養(yǎng)和PMA刺激活化
    1.3 siRNA轉(zhuǎn)染及轉(zhuǎn)染效果評估
    1.4 流式細胞表型分析
    1.5 MMA
    1.6 Western blotting
    1.7 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 流式細胞術(shù)分析CD32、CD32b的分布
    2.2 Western
    2.3 MMA
3 討論



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