為探究核酸適配體技術(shù)在食源性致病菌檢測(cè)和鑒定方面的應(yīng)用,以福氏志賀菌為研究對(duì)象,采用全細(xì)胞SELEX技術(shù)篩選與其特異性結(jié)合的適配體。經(jīng)多輪正篩和反篩,共克隆得到17條序列,4條高頻適配體(F-1、F-3、F-9和F-16)對(duì)福氏志賀菌有較高的親和力,其中F-1和F-9與福氏志賀菌的親和力較高,相應(yīng)的親和常數(shù)Kd值分別為(51.3±3.25) nmol/L和(42.6±7.11) nmol/L。軟件模擬F1和F9的二級(jí)結(jié)構(gòu),其最小自由能分別為-7.39 kcal/mol和-6.98 kcal/mol。本文首次篩選出對(duì)福氏志賀菌具有較高親和特異性的適配體,為后續(xù)利用適配體進(jìn)行食源性致病菌快速檢測(cè)奠定了基礎(chǔ)。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 適配體文庫(kù)的構(gòu)建和引物合成
    1.3 適配體篩選過(guò)程
    1.4 適配體的測(cè)序分析及二級(jí)結(jié)構(gòu)模擬
    1.5 適配體的親和特異性考察
    1.6 適配體親和常數(shù)考察
2 結(jié)果與分析
    2.1 SELEX篩選得到的適配子的克隆及序列分析
    2.2 適配子的親和特異性驗(yàn)證
    2.3 適配子的親和常數(shù)及其二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào)：3804377