目的應(yīng)用iTRAQ技術(shù)研究脾虛痰濁動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)巴馬豬小腸蛋白質(zhì)組學(xué)變化,在蛋白質(zhì)水平上探討脾虛痰濁AS豬小腸功能改變機(jī)制。方法 10只健康半歲雄性廣西巴馬小型豬,隨機(jī)分為正常對(duì)照組和脾虛痰濁AS組,每組5只。正常對(duì)照組每日給予基礎(chǔ)飼料喂飼。脾虛痰濁AS模型組采用中醫(yī)經(jīng)典復(fù)合因素造模法,即飲食不節(jié)加勞倦過度造脾虛模型,配合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)冠脈內(nèi)皮損傷手術(shù)造動(dòng)脈粥樣硬化模型。分離提取小腸總蛋白,以iTRAQ試劑標(biāo)記后進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)并以軟件分析差異表達(dá)的蛋白質(zhì),分析與小腸消化吸收、細(xì)胞炎癥反應(yīng)、脂質(zhì)代謝等有關(guān)系的代表通路。結(jié)果 iTRAQ技術(shù)分析發(fā)現(xiàn):蛋白定量結(jié)果脾虛痰濁AS組與正常對(duì)照組相比,得到99個(gè)上調(diào)蛋白和47個(gè)下調(diào)蛋白,共計(jì)146個(gè)差異蛋白,具代表性蛋白8個(gè),主要有胰脂肪酶相關(guān)蛋白2前體;MHCⅠ類抗原1-3前體;1-�；�-sn-甘油-3-磷酸�；D(zhuǎn)移酶前體;鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)體1;ATP結(jié)合盒亞家族G成員2;纖維蛋白原鏈前體等。這些蛋白存在于3條代表性通路中,分別為甘油脂類代謝通路、膽汁酸分泌通路、細(xì)胞黏附分子通路等,這些蛋白參與的生物過程可能與脂類...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動(dòng)物與分組
    1.2 試劑與儀器
    1.3 模型制備及分組
    1.4 指標(biāo)檢測(cè)及方法
        1.4.1 iTRAQ定量分析(華大基因完成)
            (1)蛋白質(zhì)提取過程:
            (2)蛋白質(zhì)濃度測(cè)量:
            (3)SDS凝膠電泳:
            (4)液質(zhì)聯(lián)用分析:
            (5)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢及信息分析:
        1.4.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 蛋白定量分析
    2.2 差異蛋白通路分析
    2.3 差異蛋白功能分析
3 討論



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