研究背景目前應(yīng)用于臨床治療的多克隆抗體主要來源于志愿者捐獻,但是靠志愿者捐獻來供應(yīng)多克隆抗體臨床使用受多方面的限制。比如,捐獻者可捐獻血量較少;具有交叉感染的風險;種類不全,從倫理學角度,很多病毒等致病抗原并不能用來免疫人類。因此,構(gòu)建可產(chǎn)生人源化抗體的動物模型成為研究重點。豬在解剖結(jié)構(gòu)及生理、免疫特性上與人類比較相近,且用豬作為試驗動物模型存在的倫理爭議較小,因此可構(gòu)建人源化豬模型來大量生產(chǎn)人源多克隆抗體。失活豬內(nèi)源性的免疫球蛋白(Ig)重鏈鉸鏈區(qū)位點可造成VDJ重排障礙,進而抑制IgM蛋白的表達,影響到B細胞的正常發(fā)育及豬內(nèi)源抗體的分泌。如果能在Ig重鏈位點失活、B細胞缺失的豬模型中,導入人源的相關(guān)基因片段,或者在B細胞發(fā)育過程中導入人源干細胞,將更有利于人源基因或細胞的互補表達,從而生成人源化嵌合體豬,在豬體內(nèi)生成人源多克隆抗體。因此,要構(gòu)建生成人源多克隆抗體的豬模型,首先要構(gòu)建Ig重鏈打靶、B細胞缺陷豬。基因打靶豬模型的構(gòu)建方法通常采用同源重組篩選基因打靶的體細胞,之后進行體細胞克隆的方式。由于傳統(tǒng)的同源重組效率非常低,因此基因打靶豬模型的構(gòu)建費時又費力。近幾年,幾種新興的基因...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
全文主要縮略語
中文摘要
英文摘要
引言
材料與方法
實驗結(jié)果
分析與討論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間發(fā)表文章情況及科研工作情況
致謝



本文編號：3751931