目的探究孕烷X受體（PXR）對HepG2細(xì)胞程序性細(xì)胞死亡因子（PDCDs）的調(diào)控作用及其分子機(jī)制。方法 HepG2細(xì)胞給予不同的PXR激動劑刺激24 h,分為利福平（10μmol/L）組、SR12813（1μmol/L）組和DMSO對照組;采用持續(xù)激活型PXR的腺病毒感染HepG2細(xì)胞（VP-PXR組和Mock對照組）36 h。應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)檢測PDCD2、PDCD4、PDCD5、PDCD6基因以及miRNA21的表達(dá)變化,采用Western blot技術(shù)檢測PDCD4的蛋白表達(dá)水平。運(yùn)用生物信息學(xué)方法預(yù)測PDCD4啟動子區(qū)存在的潛在PXR結(jié)合反應(yīng)元件（PXREs）。結(jié)果 qRT-PCR結(jié)果顯示利福平與對照組相比,PDCD2的表達(dá)顯著下調(diào)（t=-2.875,P＜0.05）,PDCD4表達(dá)則顯著上調(diào)（t=4.209,P＜0.01）,而PDCD5和PDCD6無明顯差異。SR12813與對照組相比,PDCD4表達(dá)明顯升高（t=4.574,P＜0.01）,PDCD2、PDCD5和PDCD6均無明顯變化。同時,利福平、SR12813組與對照組相比,PXR經(jīng)典靶基因MDR1的表達(dá)顯著升高... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 利福平或SR12813給藥刺激
    1.4 腺病毒感染實驗
    1.5 qRT-PCR檢測
    1.6 Western blot試驗
    1.7 生物信息學(xué)分析
    1.8 統(tǒng)計處理
2 結(jié)果
    2.1 PXR激動劑上調(diào)HepG2細(xì)胞內(nèi)PDCD4的基因表達(dá)
    2.2 過表達(dá)VP-PXR促進(jìn)HepG2細(xì)胞內(nèi)PDCD4的基因表達(dá)
    2.3 PXR活化促進(jìn)HepG2細(xì)胞內(nèi)PDCD4蛋白的表達(dá)
    2.4 PXR活化對miRNA21的表達(dá)無影響。
    2.5 PDCD4可能是PXR的下游靶基因
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-21通過PDCD4調(diào)控肝癌細(xì)胞的生長和侵襲[J]. 印滇,楊莉,張亮,繆亞軍,馮秀,王以浪.  臨床與實驗病理學(xué)雜志. 2017(04)



本文編號：3717249