目的通過(guò)比較3種肝癌細(xì)胞上清對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的活性影響,探討較長(zhǎng)時(shí)間維持細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)體外活性的新模型。方法收集培養(yǎng)48 h后的Huh7、 Hepa1-6和HepG-2等3種肝癌細(xì)胞無(wú)血清上清,分別與細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)（每組約5 000個(gè)）共培養(yǎng),對(duì)照組采用無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)后第1、3、 5、 7天,取各組混懸液50μl,臺(tái)盼藍(lán)染色后光鏡下觀察、計(jì)數(shù)并計(jì)算存活率;培養(yǎng)后第7天,于掃描電鏡下觀察原頭節(jié)超微結(jié)構(gòu),并用ELISA測(cè)定4組細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)半胱氨酸蛋白酶-3酶的活性。采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)計(jì)量數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。結(jié)果臺(tái)盼藍(lán)染色可見(jiàn),隨原頭節(jié)培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),各組存活率均不斷下降,無(wú)血清組、 Huh7組、 Hepa1-6組和HepG-2組原頭節(jié)在第5天時(shí)存活率分別為（46.54±1.11）%、（46.19±3.60）%、（55.90±2.33）%和（68.73±1.06）%;至第7天,Hepa1-6組和HepG2組原頭節(jié)存活率分別為（36.09±0.95）%和（45.69±0.40）%,與對(duì)照組（17.99±1.52）%差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.01）, H... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)的收集和處理
    1.3 肝癌細(xì)胞上清液的收集
    1.4 肝癌細(xì)胞與細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)共培養(yǎng)
    1.5 細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)形態(tài)和酶活性
        1.5.1 光鏡下觀察原頭節(jié)形態(tài)
        1.5.2 掃描電鏡觀察原頭節(jié)超微結(jié)構(gòu)
        1.5.3 半胱氨酸蛋白酶-3試劑盒檢測(cè)原頭節(jié)酶活性
    1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    1.7 倫理批準(zhǔn)和患者知情同意
2 結(jié)果
    2.1 肝癌細(xì)胞形態(tài)
    2.2 原頭節(jié)鏡下形態(tài)及生存率
    2.3 掃描電鏡對(duì)原頭節(jié)超微結(jié)構(gòu)觀察
    2.4 原頭節(jié)半胱氨酸蛋白酶-3酶活性檢測(cè)結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]不同培養(yǎng)基與飼養(yǎng)細(xì)胞組合對(duì)多房棘球絳蟲(chóng)體外培養(yǎng)模型的影響[J]. 韓振陽(yáng),鄧子,王澤宇,張示杰.  中國(guó)組織工程研究. 2019(19)
[2]在實(shí)驗(yàn)室完成細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)生活史小鼠模型的建立[J]. 王甜,鄭雪婷,齊文靜,何黎,張文寶,李琳琳,李軍.  新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(06)
[3]中國(guó)棘球蚴病防控進(jìn)展及其存在的問(wèn)題[J]. 汪天平,操治國(guó).  中國(guó)寄生蟲(chóng)學(xué)與寄生蟲(chóng)病雜志. 2018(03)
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碩士論文
[1]Huh7肝癌干細(xì)胞培養(yǎng)的方法學(xué)建立及雷公藤紅素抑制Huh7肝癌干細(xì)胞的作用機(jī)制研究[D]. 張悅.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3704198