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RORα在脂多糖所致小鼠巨噬細胞炎癥反應中的表達變化與作用實驗研究

發(fā)布時間:2022-11-06 16:11
  目的:探討RORα在脂多糖所致小鼠巨噬細胞炎癥反應過程中的表達變化與作用。方法:取小鼠骨髓來源的巨噬細胞(BMDMs),加入100 ng/ml脂多糖(LPS)處理不同時間點后,利用熒光定量PCR(qRT-PCR)法檢測細胞中炎癥因子白介素1β(IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α),以及RORα的轉錄水平變化,進一步利用Western blot檢測RORα蛋白水平變化;分別采用RORα激動劑SR1078和拮抗劑SR3335預處理細胞24 h后,LPS處理2 h,利用ELISA法檢測細胞上清中炎癥因子IL-1β,TNF-α和IL-6的含量。結果:100 ng/ml LPS在不同時間點均可顯著促進BMDMs炎癥因子IL-1β和TNF-α的轉錄水平表達(P<0.05),而在LPS處理1~12 h顯著抑制了RORα的轉錄水平(P<0.05),同時蛋白表達水平也明顯降低(P<0.05)。與LPS處理組相比,SR1078預處理,可顯著抑制炎癥因子的釋放,而SR3335進一步激活了細胞炎癥因子的釋放(P<0.05)。結論:RORα對脂多糖所致小鼠巨噬細胞炎癥反應具有調節(jié)作用。 

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1 材 料
        1.1 動物:
        1.2 細胞培養(yǎng)與分組:
        1.3 主要試劑:
    2 實驗方法
        2.1 qRT-PCR法檢測細胞中蛋白轉錄水平:
        2.2 免疫印跡法(Western blot)檢測細胞中RORα蛋白水平:
        2.3 ELISA法檢測細胞培養(yǎng)液上清中炎癥因子IL-1β,TNF-α和白介素6(Interleukin-6,IL-6)的含量:
    3 統(tǒng)計學方法
結 果
    1 BMDMs在LPS處理不同時間點蛋白轉錄水平的表達
    2 BMDMs在LPS處理不同時間點RORα蛋白水平的表達
    3 RORα對LPS所致巨噬細胞炎癥因子釋放的影響
討 論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]The Roles of Orphan Nuclear Receptors in the Development and Function of the Immune System[J]. Ivan Dzhagalov.  Cellular & Molecular Immunology. 2004(06)
[2]惡性腫瘤、創(chuàng)傷及炎癥患者血清TNF-α、IL-6和sIL-2R含量的比較[J]. 張喜平,李宗芳,程琪輝,曾小瀾,劉效恭.  陜西醫(yī)學雜志. 2002(01)
[3]膿毒癥診斷的生物學標志物[J]. 王東強,田永超,李志軍.  陜西醫(yī)學雜志. 2011(03)
[4]白藜蘆醇對脂多糖引起小膠質細胞激活的影響[J]. 周雷鳴,張玲,房明崗,賈濟.  陜西醫(yī)學雜志. 2014(11)

碩士論文
[1]蛋白4.1R在LPS誘導的膿毒癥中的作用及其調控機制研究[D]. 王成博.鄭州大學 2018



本文編號:3703809

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