在體外培養(yǎng)人皮膚瘢痕組織成纖維細(xì)胞時,用長春新堿（VCR）刺激后,采用TUNEL染色觀察成纖維細(xì)胞的凋亡情況;用流式細(xì)胞技術(shù)測定成纖維細(xì)胞的凋亡率; Western blot檢測細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通路相關(guān)蛋白的變化,探討VCR通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞凋亡。結(jié)果表明:細(xì)胞經(jīng)VCR刺激后, TUNEL染色和流式細(xì)胞技術(shù)檢測結(jié)果提示在VCR刺激后成纖維細(xì)胞明顯發(fā)生凋亡。Western blot檢測顯示經(jīng)VCR處理后成纖維細(xì)胞中促凋亡蛋白表達(dá)升高,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)記蛋白和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激信號通道蛋白的表達(dá)上升;而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通道抑制劑4-苯基丁酸鈉鹽可有效逆轉(zhuǎn)這一現(xiàn)象。這一研究提示VCR可誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞凋亡,而這一現(xiàn)象可能是通過激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激途徑而實現(xiàn)的。 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和藥品
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 流式細(xì)胞技術(shù)檢測凋亡率
    1.4 TUNEL染色檢測成纖維細(xì)胞凋亡現(xiàn)象
    1.5 Western blot分析
    1.6 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果與分析
    2.1 VCR刺激成纖維細(xì)胞后的凋亡變化
    2.2 VCR對凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.3 VCR對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
    2.4 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通道抑制劑4-PBA對CHOP、GRP78、Bax、Bcl-2表達(dá)的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]氧化苦參堿誘導(dǎo)胃癌BGC-823細(xì)胞發(fā)生caspase-12依賴性內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡的機(jī)制研究[J]. 房偉,馬世勛,馬云濤,詹渭鵬,李淵,李一平,狐鳴.  中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志. 2019(04)
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