目的探究突觸黏附分子NECL4對Ca²⁺-CaMKII-CDC42信號通路和樹突棘數量的影響。方法以Necl4全身性敲除小鼠為研究對象,對8周齡的Necl4野生（WT）及敲除（KO）小鼠腦組織進行高爾基染色,對大腦皮質第Ⅱ/Ⅲ層椎體神經元二級樹突上樹突棘密度進行統計。通過Western blot和RT-qPCR實驗對Ca²⁺-CaMKII信號通路及其下游信號分子的蛋白和mRNA表達水平進行檢測,包括CDC42、Rac1、RhoA、H-Ras、ERK等信號蛋白。結果高爾基染色結果顯示,Necl4敲除小鼠大腦皮質第Ⅱ/Ⅲ層椎體神經元二級樹突上樹突棘數量與野生型小鼠相比減少（P＜0.01）。Western blot實驗結果顯示CaMKIIα（P＜0.05）及phospho-CaMKIIα（Thr286）（P＜0.05）在Necl4敲除小鼠中表達降低,CaMKIIα的下游信號分子CDC42的mRNA水平（P＜0.05）和蛋白水平（P＜0.05）在Necl4敲除小鼠中均表達降低。結論 NECL4通過Ca²⁺-CaMKII-CDC4... 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物:
        1.1.2 主要試劑:
    1.2 方法
        1.2.1 Golgi-Cox染色及樹突棘密度的數量統計:
        1.2.2 Western blot檢測蛋白表達:
        1.2.3 實時熒光定量PCR檢測mRNA水平:
    1.3 統計學分析
2 結果
    2.1 高爾基染色顯示Necl4敲除后二級樹突上樹突棘數量減少
    2.2 Necl4敲除后CaMKIIα及phospho-CaMKIIα蛋白在大腦皮質表達下降
    2.3 Necl4敲除后CDC42在大腦皮質的表達下降
    2.4 Rac1、H-Ras、RhoA 3種小GTPase蛋白的mRNA水平在Necl4敲除后有下降的趨勢
    2.5 ERK及phospho-ERK在Necl4敲除后有升高的趨勢
3 討論



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