目的:研究小干擾RNA（siRNA）干擾WT1基因表達(dá)的小鼠足細(xì)胞Wnt/β-catenin信號通路的變化及其對足細(xì)胞活力和nephrin表達(dá)的影響。方法:采用RPMI-1640培養(yǎng)基在33℃條件下傳代培養(yǎng)足細(xì)胞,在37℃條件下誘導(dǎo)足細(xì)胞分化。應(yīng)用WT1基因的siRNA轉(zhuǎn)染分化成熟的小鼠足細(xì)胞,用MTT法測定細(xì)胞活力,用實(shí)時(shí)qRT-PCR和Western blotting技術(shù)分別檢測mRNA和蛋白的表達(dá)。結(jié)果:RNA干擾WT1可誘導(dǎo)小鼠足細(xì)胞Wnt1mRNA和蛋白表達(dá)上調(diào),p-β-catenin水平降低及足細(xì)胞活力下降,伴有足細(xì)胞nephrin mRNA和蛋白的表達(dá)明顯下調(diào)。結(jié)論:沉默WT1基因的表達(dá)可誘導(dǎo)足細(xì)胞活力下降和nephrin表達(dá)下調(diào),可能與Wnt/β-catenin信號通路的激活有關(guān)。 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
材 料 和 方 法
    1 細(xì)胞
    2 主要試劑
    3 主要方法
    4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié) 果
    1 WT1 siRNA轉(zhuǎn)染足細(xì)胞的效率
    2 siRNA沉默對胞內(nèi)Wnt1水平的影響
    3 siRNA沉默WT1基因?qū)Π麅?nèi)β-catenin水平的影響
    4 siRNA沉默對足細(xì)胞活力的影響
    5 WT1沉默對小鼠足細(xì)胞nephrin mRNA的影響
    6 WT1沉默對nephrin蛋白水平的影響
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Wnt信號通路在食管癌細(xì)胞放射抗拒性形成中的作用[J]. 李海英,張力,潘歡樂,方雅,吳建波.  中國病理生理雜志. 2012(09)
[2]黃芪多糖對早期糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞nephrin和podocin表達(dá)的影響[J]. 李志杰,張悅,劉煜敏,陸海英,李亞麗,張燕.  中國病理生理雜志. 2011(09)
[3]糖尿病腎病腎小球nephrin表達(dá)的變化[J]. 覃喬靜,鄧華聰,曹文富.  中國病理生理雜志. 2007(02)



本文編號：3682208