堿性成纖維細胞生長因子及胰島素樣生長因子1對精原干細胞增殖凋亡影響的機制
發(fā)布時間:2022-08-23 20:40
背景:生長因子作為體外細胞培養(yǎng)和體內(nèi)細胞生長及增殖必需的調(diào)節(jié)因子,一直被廣泛的關(guān)注。目的:探討堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)與胰島素樣生長因子1(insulin-like growth facter,IGF-1)聯(lián)合作用對小鼠精原干細胞增殖、凋亡的影響。方法:從6-8d齡昆明雄性小鼠睪丸內(nèi)分離培養(yǎng)精原干細胞并進行鑒定。將精原干細胞接種于經(jīng)絲裂霉素C處理過的胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層上,分組干預(yù):對照組加入正常DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng);b FGF、IGF-1組分別加入含20μg/L bFGF、20μg/L IGF-1的DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng);b FGF+IGF-1組同時加入含20μg/L b FGF及20μg/L IGF-1的DMEM培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。采用CCK-8、EDU染色法分別檢測精原干細胞增殖活性,流式細胞儀檢測精原干細胞生長周期和細胞凋亡情況,Western blot檢測增殖和凋亡相關(guān)蛋白PCNA、Bax、Bcl-2的表達。結(jié)果與結(jié)論:①與對照組比較,b FGF組、IGF-1組、b FGF+IGF-1組吸光度值顯著升高,與...
【文章頁數(shù)】:6 頁
【文章目錄】:
文章快速閱讀:
文題釋義:
縮略語:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 設(shè)計
1.2 時間及地點
1.3 材料
1.3.1 實驗動物
1.3.2 實驗細胞
1.3.3 實驗試劑與儀器
1.4 方法
1.4.1 胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層的準備
1.4.2 精原干細胞得分離、培養(yǎng)與鑒定
1.4.3 實驗分組
1.4.4 CCK-8檢測細胞增殖
1.4.5 EDU免疫熒光分析法檢測細胞增殖
1.4.6 流式細胞儀檢測細胞周期
1.4.7 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.5 主要觀察指標
1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
2.1 精原干細胞的形態(tài)和鑒定
2.2 CCK-8法檢測細胞增殖
2.3 EDU檢測細胞增殖情況
2.4 流式細胞術(shù)檢測細胞周期
2.5 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況
3 討論Discussion
【參考文獻】:
期刊論文
[1]EdU摻入法研究炎癥狀態(tài)下小鼠骨髓粒系的增殖[J]. 任仟,張瀟予,郭榮霞,謝忻琰,張?zhí)K東,謝雪梅,范玉萍,王永榮,張存玲,王彤,劉飛,劉鵬,許元富,羅鴻博. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2018 (04)
[2]靈長類動物精原干細胞的研究進展[J]. 范翠花,蘭風(fēng)華,陳杭,張朵. 中華男科學(xué)雜志. 2016(04)
[3]Bcl-2基因的研究進展[J]. 付倩梅,李曉明. 西南軍醫(yī). 2014(01)
[4]促生長因子對小鼠精原干細胞體外增殖作用的研究[J]. 凡志國,胡建宏,索麗娟,李青旺,江中良,呂瑞凱,劉玉,莫金鑫,強者. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2011(09)
[5]生長因子對人精原干細胞體外存活和增殖的影響[J]. 郭雪華,藺勇,王曄玲,鄭連文. 中華男科學(xué)雜志. 2008(10)
[6]bcl-2/bax基因調(diào)控機體細胞凋亡的機制研究進展[J]. 王彤,劉存志,劉玉珍,于建春,韓景獻. 中國老年學(xué)雜志. 2008(16)
[7]增殖細胞核抗原(PCNA)的分子結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能研究進展[J]. 宋楠萌,桑建利,徐恒. 自然科學(xué)進展. 2006(10)
[8]體外培養(yǎng)條件下SCF、LIF與bFGF對昆明白小鼠精原干細胞增殖的影響[J]. 尹明,李德雪. 生物工程學(xué)報. 2002(06)
本文編號:3678443
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0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 設(shè)計
1.2 時間及地點
1.3 材料
1.3.1 實驗動物
1.3.2 實驗細胞
1.3.3 實驗試劑與儀器
1.4 方法
1.4.1 胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層的準備
1.4.2 精原干細胞得分離、培養(yǎng)與鑒定
1.4.3 實驗分組
1.4.4 CCK-8檢測細胞增殖
1.4.5 EDU免疫熒光分析法檢測細胞增殖
1.4.6 流式細胞儀檢測細胞周期
1.4.7 流式細胞儀檢測細胞凋亡
1.5 主要觀察指標
1.6 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果Results
2.1 精原干細胞的形態(tài)和鑒定
2.2 CCK-8法檢測細胞增殖
2.3 EDU檢測細胞增殖情況
2.4 流式細胞術(shù)檢測細胞周期
2.5 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況
3 討論Discussion
【參考文獻】:
期刊論文
[1]EdU摻入法研究炎癥狀態(tài)下小鼠骨髓粒系的增殖[J]. 任仟,張瀟予,郭榮霞,謝忻琰,張?zhí)K東,謝雪梅,范玉萍,王永榮,張存玲,王彤,劉飛,劉鵬,許元富,羅鴻博. 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2018 (04)
[2]靈長類動物精原干細胞的研究進展[J]. 范翠花,蘭風(fēng)華,陳杭,張朵. 中華男科學(xué)雜志. 2016(04)
[3]Bcl-2基因的研究進展[J]. 付倩梅,李曉明. 西南軍醫(yī). 2014(01)
[4]促生長因子對小鼠精原干細胞體外增殖作用的研究[J]. 凡志國,胡建宏,索麗娟,李青旺,江中良,呂瑞凱,劉玉,莫金鑫,強者. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2011(09)
[5]生長因子對人精原干細胞體外存活和增殖的影響[J]. 郭雪華,藺勇,王曄玲,鄭連文. 中華男科學(xué)雜志. 2008(10)
[6]bcl-2/bax基因調(diào)控機體細胞凋亡的機制研究進展[J]. 王彤,劉存志,劉玉珍,于建春,韓景獻. 中國老年學(xué)雜志. 2008(16)
[7]增殖細胞核抗原(PCNA)的分子結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能研究進展[J]. 宋楠萌,桑建利,徐恒. 自然科學(xué)進展. 2006(10)
[8]體外培養(yǎng)條件下SCF、LIF與bFGF對昆明白小鼠精原干細胞增殖的影響[J]. 尹明,李德雪. 生物工程學(xué)報. 2002(06)
本文編號:3678443
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