粘質(zhì)沙雷菌（Serratia marcescens）是一種桿狀的革蘭氏陰性細(xì)菌,是條件致病菌的一種,主要引起醫(yī)源性感染。當(dāng)機(jī)體免疫功能下降時(shí),能引起多種感染性疾病,如肺炎、腦膜炎和敗血癥等。近年來,由于抗生素的大量使用,耐藥性粘質(zhì)沙雷菌的分離率越來越高,耐藥菌株引起的爆發(fā)流行的案例報(bào)道也越來越多,導(dǎo)致了臨床治療粘質(zhì)沙雷菌感染的難度越來越大。因此,許多學(xué)者開始尋找能夠替代抗生素的殺菌物質(zhì)。噬菌體作為專門裂解細(xì)菌的病毒,具有嚴(yán)格的宿主特異性,在殺死宿主菌的同時(shí),不會殺死其它正常菌群,是良好的抗生素替代品之一。本研究以多重耐藥的粘質(zhì)沙雷菌為宿主菌,從廢水樣品中分離出了兩株烈性噬菌體,分別命名為vB_SmaA₂050H1和vB_SmaM₂050HW,分析和研究了它們的形態(tài)學(xué)、生物學(xué)、分子遺傳學(xué)和基因組學(xué)特征,為多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌的防治提供了新的思路。通過雙層平板的噬菌斑顯示,噬菌體vB_SmaA₂050H1的噬菌斑小而透明,直徑為1.23±0.29 mm;噬菌體vB

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
    1 粘質(zhì)沙雷菌概述
    2 噬菌體概述
    3 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的研究現(xiàn)狀和進(jìn)展
    4 本研究的內(nèi)容和意義
第一章 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的分離
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 菌種及樣品
        1.1.2 主要試劑與溶液配制
        1.1.3 主要儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 臨床粘質(zhì)沙雷菌的分離和耐藥性分析
        1.2.2 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的分離
        1.2.3 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體原種的制備
        1.2.4 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的效價(jià)測定
    1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.3.1 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體宿主的確定
        1.3.2 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的分離
        1.3.3 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體原種的制備
        1.3.4 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的噬菌斑特性和效價(jià)測定
    1.4 討論與分析
第二章 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的生物學(xué)特性
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器
        2.1.1 菌種與噬菌體
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 噬菌體顆粒的提取和純化
        2.2.2 透射電鏡下觀察兩株噬菌體的形態(tài)
        2.2.3 噬菌體一步生長曲線的測量和爆發(fā)量的估算
        2.2.4 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體宿主譜的研究
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的顯微形態(tài)特征
        2.3.2 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體的一步生長曲線
        2.3.3 粘質(zhì)沙雷菌噬菌體宿主譜測定結(jié)果
    2.4 討論與分析
第三章 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體受體的探究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 主要儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)菌膜蛋白受體驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 細(xì)菌胞外多糖受體驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 熱酚水法提取粘質(zhì)沙雷菌wk2050 的細(xì)菌胞外多糖
        3.2.4 細(xì)菌胞外多糖在體外抑制噬菌體吸附實(shí)驗(yàn)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 細(xì)菌膜蛋白受體驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.2 胞外多糖受體驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.3 胞外多糖在體外抑制噬菌體吸附的量化實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.4 討論與分析
第四章 多重耐藥粘質(zhì)沙雷菌噬菌體基因組分析
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 主要試劑
        4.1.2 主要儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 苯酚-氯仿法提取和純化噬菌體全基因組
        4.2.2 噬菌體全基因組測序
        4.2.3 噬菌體基因組預(yù)測編碼ORFs的功能注釋
        4.2.4 比較基因組學(xué)
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 噬菌體全基因組的提取和純化
        4.3.2 噬菌體全基因組測序
        4.3.3 噬菌體基因組預(yù)測編碼ORFs的功能注釋和分析
        4.3.4 比較基因組學(xué)
    4.4 討論與分析
第五章 結(jié)論和展望
    5.1 結(jié)論
        5.1.1 噬菌體的分離
        5.1.2 噬菌體生物學(xué)性狀
        5.1.3 噬菌體受體初步探究
        5.1.4 噬菌體全基因組分析
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
附錄A 附表
作者在學(xué)期間取得的學(xué)術(shù)成果
附件
主要簡歷
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3666446