為了研發(fā)結(jié)核新型亞單位疫苗,以納米顆粒為載體展示結(jié)核分枝桿菌主要抗原ESAT6.將ESAT6基因片段克隆到位于pGEX-4T-1載體上的諾如病毒P結(jié)構(gòu)域的Loop2中,轉(zhuǎn)入大腸桿菌BL21（DE3）進(jìn)行表達(dá),用GST親和柱純化,并通過FPLC分析嵌合納米顆粒的形成效率,最后免疫BALB/c小鼠進(jìn)行免疫原性的評價.結(jié)果表明:研究成功地將ESAT6基因克隆至諾如病毒P結(jié)構(gòu)域的Loop2中,且空間結(jié)構(gòu)模擬提示ESAT6能展示在P納米顆粒的表面. FPLC分析表明,表達(dá)的嵌合蛋白可以高效地自我組裝成納米顆粒.用該嵌合顆粒免疫小鼠后,能誘導(dǎo)產(chǎn)生針對ESAT6重組嵌合顆粒的特異性抗體.進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn),誘導(dǎo)的抗體主要針對ESAT6的51～70肽段,而不是1～20肽段.綜上,研究通過諾如病毒P顆粒成功地展示了結(jié)核分枝桿菌主要抗原ESAT6,為進(jìn)一步研發(fā)結(jié)核新型亞單位疫苗奠定了基礎(chǔ). 

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【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]結(jié)核分枝桿菌H37Ra FadD3基因克隆與表達(dá)研究[J]. 袁方,陳元曉,Stephanie Dawes,Edward N.Baker.  云南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2014(04)



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