目的觀察高鹽對(duì)乳鼠心臟成纖維細(xì)胞（CFs）增殖及膠原分泌的影響,并分析其可能的相關(guān)機(jī)制。方法胰酶、Ⅱ型膠原酶兩步消化法消化分離乳鼠心肌組織,通過(guò)差速貼壁法收集、培養(yǎng)乳鼠CFs。CFs傳至第4代去血清同步化24 h,分為對(duì)照組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度139 mmol/L）、高鹽組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度146、149、152、155、158、161、164、167、170、173和176 mmol/L）,培養(yǎng)24、48、72和96 h后,CCK-8檢測(cè)CFs增殖情況。選擇增殖作用最為明顯的Na⁺濃度和作用時(shí)間,以Na⁺ 139 mmol/L為對(duì)照進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),高鹽組（培養(yǎng)基Na⁺終濃度161 mmol/L）,甘露醇組（甘露醇濃度為29.334 mg/ml）,其中甘露醇組與高鹽組滲透壓相同。CCK-8檢測(cè)滲透壓對(duì)CFs增殖的影響。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)CFs培養(yǎng)上清液中Ⅰ型和Ⅲ型膠原的表達(dá)。Western印跡檢測(cè)CFs中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子（TGF）-β1、p-smad3及smad7蛋... 

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理
    1.3 乳鼠CFs的培養(yǎng)及鑒定
    1.4 CCK-8測(cè)高鹽對(duì)乳鼠CFs增殖的影響并篩選促CFs增殖的最佳Na+濃度和作用時(shí)間
    1.5 CCK-8增殖試劑盒檢測(cè)滲透壓對(duì)乳鼠CFs增殖的影響
    1.6 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)高鹽對(duì)乳鼠CFs中Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原表達(dá)的影響
    1.7 Western印跡檢測(cè)高鹽對(duì)乳鼠CFs中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表達(dá)的影響
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié) 果
    2.1 乳鼠CFs的生長(zhǎng)形態(tài)及鑒定
    2.2 高鹽誘導(dǎo)乳鼠CFs增殖的時(shí)效量效關(guān)系及促CFs增殖的最佳Na+濃度和作用時(shí)間
    2.3 滲透壓對(duì)乳鼠CFs增殖的影響
    2.4 高鹽對(duì)大鼠CFs Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原分泌的影響
    2.5 高鹽對(duì)大鼠CFs 中TGF-β1、p-smad3、smad7蛋白表達(dá)的影響
3 討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高鹽誘導(dǎo)Wistar大鼠腎損害的機(jī)制及替米沙坦的干預(yù)效果[J]. 王曉春,商黔惠,石耿輝.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2015(12)
[2]乳鼠心肌細(xì)胞和心肌成纖維細(xì)胞體外分離培養(yǎng)方法的優(yōu)化[J]. 朱曉麗,王麗,馬依彤,楊毅寧,陳邦黨,馬苗苗.  中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志. 2015(01)
[3]替米沙坦對(duì)高鹽飲食誘導(dǎo)大鼠心肌重構(gòu)的影響[J]. 石耿輝,商黔惠,吳芹,王曉春.  中華高血壓雜志. 2013(08)
[4]轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1/Smads表達(dá)在高鹽飲食致Wistar大鼠心肌纖維化中的作用及替米沙坦干預(yù)[J]. 李同,商黔惠,劉嬋,石耿輝.  中華高血壓雜志. 2013(07)
[5]長(zhǎng)期高鹽飲食對(duì)Wistar大鼠血壓和腎臟的影響及替米沙坦干預(yù)研究[J]. 王曉春,商黔惠,祝榮文,吳芹.  中華高血壓雜志. 2013(03)
[6]TGF-β1/Smads和ERK表達(dá)異常在高鹽飲食誘導(dǎo)的大鼠血管重構(gòu)中的作用[J]. 劉嬋,商黔惠,閔曉強(qiáng),陳劍玲,毛萬(wàn)姮.  中國(guó)病理生理雜志. 2012(10)
[7]TGF-β/Smads信號(hào)通路在心肌纖維化發(fā)生和治療中應(yīng)用前景的研究進(jìn)展[J]. 陳蓉,謝梅林.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2012(09)



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