一、研究目的1、掌握小鼠肌源性干細胞（MDSC）懸浮培養(yǎng)相關(guān)細胞技術(shù),建立MDSC懸浮培養(yǎng)模型,為進行局部密度差異懸浮培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。2、在懸浮培養(yǎng)肌源性干細胞（MDSC）的基礎(chǔ)上初步探討集簇與分散培養(yǎng)（局部密度差異）對MDSC增殖活性的影響,以篩選更利于MDSC增殖的培養(yǎng)方式。3、以懸浮集簇培養(yǎng)為基礎(chǔ),模擬體內(nèi)MDSC自我更新與增殖環(huán)境,探索以成纖維細胞和衛(wèi)星細胞作為滋養(yǎng)細胞對MDSC增殖的作用,初步探討懸浮共培養(yǎng)對MDSC增殖的影響機制。4、在已建立的與衛(wèi)星細胞直接接觸懸浮共培養(yǎng)模式的基礎(chǔ)上,對比單純懸浮培養(yǎng)法和最常用的傳統(tǒng)差速貼壁培養(yǎng)法,觀察不同培養(yǎng)方法得到MDSC細胞量差異及對MDSC的影響,驗證懸浮共培養(yǎng)模式的優(yōu)勢。二、研究方法1、實驗用2周齡C57BL/6小鼠40只,通過機械分離采取四肢骨骼肌、多步酶消化法制備細胞懸液,采用懸浮培養(yǎng)的方式培養(yǎng)細胞并進行細胞計數(shù),用流式細胞術(shù)檢測細胞表面干性因子,誘導分化驗證其干性。2、實驗用2周齡C57BL/6小鼠20只,通過機械分離采取四肢骨骼肌、多步酶消化法制備細胞懸液進行懸浮培養(yǎng)獲取MDSC,在培養(yǎng)過程中分別吹打與靜置。光鏡觀察與細胞計... 

【文章來源】：北京協(xié)和醫(yī)學院北京市211工程院校985工程院校

【文章頁數(shù)】：120 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分: 肌源性干細胞(MDSC)懸浮培養(yǎng)增殖純化方法研究
    實驗目的
    主要實驗材料與儀器
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第二部分:懸浮集簇培養(yǎng)與懸浮分散培養(yǎng)對MDSC增殖的影響研究
    實驗目的
    主要實驗材料與儀器
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第三部分: 懸浮共培養(yǎng)對MDSC增殖的影響研究
    實驗目的
    主要實驗材料與儀器
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
第四部分: MDSC的懸浮(共)培養(yǎng)法與傳統(tǒng)培養(yǎng)法比較研究
    實驗目的
    主要實驗材料與儀器
    實驗方法
    實驗結(jié)果
    討論
    結(jié)論
全文總結(jié)
參考文獻
縮略語
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]成年大鼠骨骼肌干細胞的制備與新型培養(yǎng)方法[J]. 黃郁凱,李曉紅,潘宇,林秋雄,朱杰寧,江雪燕,葉力通,余細勇.  中國病理生理雜志. 2013(01)
[2]誘導人眼輪匝肌來源肌源干細胞向許旺細胞樣細胞的分化[J]. 丁維進,張文俊,孫美慶,蘇志達,李翠,劉安堂,江華.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(32)
[3]兔肌源性干細胞分離培養(yǎng)及誘導分化為神經(jīng)細胞的研究[J]. 董月桐,冀晨陽,張金明.  中華實驗外科雜志. 2008 (06)
[4]應用Percoll分離純化組織工程用肌衛(wèi)星細胞[J]. 張玉石,李漢忠,張銳強,王彭,嚴維剛.  中國醫(yī)學科學院學報. 2006(02)



本文編號：3632931