發(fā)布時(shí)間：2022-01-20 12:20

　　目的:研究重組腺相關(guān)病毒9型（Recombinant adeno-associated viral vector type9,rAAV9）介導(dǎo)的降鈣素基因相關(guān)肽（Calcitonin gene-related peptide,CGRP）對(duì)自發(fā)性高血壓大鼠（Spontaneously hypertensive rats,SHR）血壓及SHR大鼠心臟、腎臟病理形態(tài)學(xué)的影響。方法:1.將12只自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）,隨機(jī)分為3組,每組大鼠4只,雌雄大鼠各2只,各組大鼠分別為:實(shí)驗(yàn)組（rAAV9-CGRP）、空載體組（rAAV9-Lac）、空白對(duì)照組（生理鹽水）。2.采用BP-2010A無(wú)創(chuàng)動(dòng)物血壓測(cè)量系統(tǒng),間接測(cè)量自發(fā)性高血壓大鼠鼠尾血壓,檢測(cè)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物干預(yù)后血漿中CGRP的濃度。3.連續(xù)測(cè)量6周后,處死大鼠,測(cè)量各組大鼠左心室重量指數(shù),檢測(cè)各組大鼠心肌膠原容積分?jǐn)?shù),檢測(cè)各組大鼠心肌組織中的CGRP的表達(dá)含量,觀察各組大鼠腎臟病理形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)組血壓在第三周較自身初始血壓明顯降壓,降壓效果持續(xù)至實(shí)驗(yàn)結(jié)束（p<0.05）,實(shí)驗(yàn)組血壓在第四周較空載體組血壓有明顯差異,并持... 

【文章來(lái)源】：湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

藍(lán)色為膠原像素

rAAV9-CGRP 治療 SHR 大鼠高血壓的實(shí)驗(yàn)研究15圖1-6 組織像素面積2.2.7 石蠟切片心肌免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟（1）石蠟切片脫蠟至水：準(zhǔn)備二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ，將切片依次放入其中，時(shí)間分別為 5 分鐘。再準(zhǔn)備無(wú)水乙醇Ⅰ、無(wú)水乙醇Ⅱ，依次放入切片，時(shí)間分別為5 分鐘。之后再分別置于 80%、75%酒精，分別皆為 5 分鐘。取出，用蒸餾水沖洗。（2）抗原修復(fù)：準(zhǔn)備修復(fù)盒,將心肌組織切片置于其中, 內(nèi)有 EDTA 抗原修復(fù)緩沖液（PH9.0）。將其放入到微波爐當(dāng)中，完成抗原修復(fù)。在此過(guò)程中需要注意觀察，防止緩沖液過(guò)度蒸發(fā)，避免干片現(xiàn)象。完成后取出切片，室溫下自然冷卻。準(zhǔn)備 PBS（PH7.4），切片置于其中。脫色搖床上，晃動(dòng)洗滌，這一過(guò)程要反復(fù)進(jìn)行三次

程：收縮壓=182.538-9.148×時(shí)間+0.770×時(shí)間2（P<0.05 回歸分析）見(jiàn)圖3-2，空載體組在注射rAAV9-LacZ后血壓與時(shí)間無(wú)相關(guān)性（sig＞0.05 n=24 相關(guān)性分析），空白對(duì)照組在注射生理鹽水后血壓與時(shí)間無(wú)相關(guān)性（sig＞0.05 n=24 相關(guān)性分析）。 處死動(dòng)物時(shí)，實(shí)驗(yàn)組血壓未見(jiàn)明顯回升。表3-1 各組大鼠收縮壓變化（ x ±s mmHg）注：實(shí)驗(yàn)組注射前、注射后2周與第3周、第4周、第5周、6周相比較，有顯著差異（△P<0.05)；實(shí)驗(yàn)組與空載體組相比較，第4周、第5周、第6周有顯著差異 （#P<0.05 )

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]腺相關(guān)病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮型一氧化氮合酶在高血壓基因治療中的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 付軍.吉林大學(xué) 2009

碩士論文
[1]降鈣素基因相關(guān)肽對(duì)缺氧/復(fù)氧大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制[D]. 王晨.山西醫(yī)科大學(xué) 2018



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