目的優(yōu)化B細(xì)胞亞群及其組織分布的流式細(xì)胞分析的熒光染色方案,以用于免疫調(diào)控藥物的活性評價。方法取小鼠外周血、腹膜腔細(xì)胞、脾細(xì)胞、淋巴結(jié)細(xì)胞和骨髓細(xì)胞,分別通過3種熒光抗體染色方案對各種細(xì)胞進(jìn)行染色:①抗B220,CD5和CD11b的熒光抗體及7-氨基放線菌素D（7-AAD）染色;②抗B220,CD43,CD93,CD23和IgM的熒光抗體及7-AAD染色;③抗B220,CD27和CD138的熒光抗體及7-AAD染色。然后利用流式細(xì)胞術(shù)分析B細(xì)胞亞群,通過優(yōu)化的表面標(biāo)志物組合確定各種B細(xì)胞亞群,再統(tǒng)計各種B細(xì)胞亞群在多種組織中的分布。結(jié)果第①種染色方案可區(qū)分B1a,B1b和B2細(xì)胞;第②種染色方案可區(qū)分原始B細(xì)胞、不成熟和成熟B細(xì)胞;第③種染色方案可區(qū)分記憶性B細(xì)胞和漿細(xì)胞。外周血中主要包含成熟B細(xì)胞和一種特殊的不成熟B細(xì)胞;腹膜腔中主要包含B1a細(xì)胞和成熟B細(xì)胞;脾中主要包含成熟B細(xì)胞、邊緣區(qū)B細(xì)胞及T1和T2期不成熟B細(xì)胞;淋巴結(jié)中主要包含成熟B細(xì)胞;骨髓中包含各種發(fā)育階段B細(xì)胞,主要包含前B細(xì)胞（pre-B細(xì)胞）和T1期不成熟B細(xì)胞。記憶性B細(xì)胞和漿細(xì)胞在各種組織中都只占B細(xì)胞的較... 

【文章來源】：中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2020,34(04)北大核心

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 動物、試劑和儀器
    1.2 細(xì)胞樣本制備
    1.3 熒光抗體孵育
    1.4 流式細(xì)胞分析
    1.5 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 外周血中B細(xì)胞及其亞群的比例
    2.2 腹膜腔中B細(xì)胞及其亞群的比例
    2.3 脾中B細(xì)胞及其亞群的比例
    2.4 淋巴結(jié)中B細(xì)胞及其亞群的比例
    2.5 骨髓中B細(xì)胞及其亞群的比例
3 討論



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