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逆轉(zhuǎn)錄酶的功能性研究

發(fā)布時(shí)間:2022-01-08 09:42
  人類(lèi)免疫缺陷病毒(HIV),是造成人類(lèi)免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒,該病毒屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,慢病毒屬。同所有逆轉(zhuǎn)錄病毒一樣含有兩條基本相同的正鏈RNA作為基因組。逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的復(fù)制,是在逆轉(zhuǎn)錄酶(RT)的作用下,以病毒RNA基因組為模板,經(jīng)過(guò)兩次精確的鏈轉(zhuǎn)移步驟(與模板分離/再結(jié)合),逆轉(zhuǎn)錄成兩端分別帶有相同LTR的雙鏈前病毒DNA基因組而完成。迄今為止,研究者對(duì)病毒逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中鏈轉(zhuǎn)移的研究一般使用三個(gè)系統(tǒng):第一個(gè)系統(tǒng)應(yīng)用兩個(gè)攜帶不同RNA基因組病毒的單輪感染系統(tǒng)。在該系統(tǒng)中進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí),逆轉(zhuǎn)錄酶可以在同一模板不同位點(diǎn)或不同模板之間發(fā)生鏈轉(zhuǎn)移作用。然而,只有發(fā)生在同一方向的鏈轉(zhuǎn)移才可能產(chǎn)生可以整合到宿主細(xì)胞基因組中的雙鏈前病毒DNA。這樣的鏈轉(zhuǎn)移現(xiàn)象很容易通過(guò)前病毒DNA測(cè)序方法被檢測(cè)到。但如果逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程異常終止,或發(fā)生方向相反的異常鏈轉(zhuǎn)移就可能產(chǎn)生兩端缺失LTR的DNA產(chǎn)物,不能完成前病毒DNA的整合步驟,故而這樣的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無(wú)法被檢測(cè)到。第二個(gè)系統(tǒng)使用一對(duì)供體RNA和受體RNA,利用標(biāo)記性逆轉(zhuǎn)錄引物起始逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),當(dāng)c DNA沿“供體RNA”逆轉(zhuǎn)錄至模板的5’端時(shí),通過(guò)5’端所含... 

【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:132 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

逆轉(zhuǎn)錄酶的功能性研究


逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的鏈轉(zhuǎn)移模型

鏈轉(zhuǎn)移,機(jī)制,片段,逆轉(zhuǎn)錄酶


3 圖 1.3 切入 機(jī)制引發(fā)鏈轉(zhuǎn)移Chen, Robert, et al. The Journal of Biological Chemistry, 2003)合成 cDNA 片段時(shí)(帶箭頭黑色實(shí)線),逆轉(zhuǎn)錄酶的 RNase),暴露出正在合成的 cDNA 片段,使供者模板(灰色實(shí)線)

位點(diǎn),受者,同源區(qū),同源序列


4 圖 1.4 切入位點(diǎn)的確定(Vandana PB, Min S, et al. Virus Research, 2008)色)和受者模板(紅色)重合的區(qū)域?yàn)橥葱蛄袇^(qū)。不板的 同源區(qū)序列完全同源。因此,這些核酸鏈可競(jìng)爭(zhēng)


本文編號(hào):3576330

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