發(fā)布時(shí)間：2022-01-01 18:25

　　通過(guò)觀(guān)察miR-125b-5p對(duì)分枝桿菌在宿主細(xì)胞和小鼠體內(nèi)存活情況的影響,探究其在抗結(jié)核免疫過(guò)程中的作用。采用不同培養(yǎng)基對(duì)分枝桿菌進(jìn)行培養(yǎng)并計(jì)數(shù);以1640培養(yǎng)基加10%胎牛血清培養(yǎng)所有實(shí)驗(yàn)用細(xì)胞。將終濃度50 nmol/L的miR-125b-5p模擬物、miR-125b-5p抑制劑及磷酸鹽緩沖液（PBS）對(duì)照加入細(xì)胞后,在不同時(shí)間點(diǎn)收集細(xì)胞。用分枝桿菌分別感染宿主細(xì)胞（A549、THP-1和RAW264.7）以及C57BL/6小鼠。采用定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)miR-125b-5p的表達(dá)量。結(jié)果miR-125b-5p在分枝桿菌感染的多種宿主細(xì)胞及小鼠中都顯著上調(diào)表達(dá),其中小鼠肺部的表達(dá)量提高了約15倍。分別轉(zhuǎn)染模擬物和抑制劑后,再用分枝桿菌感染細(xì)胞,結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-125b-5p可促進(jìn)分枝桿菌在宿主細(xì)胞內(nèi)的生長(zhǎng)。當(dāng)miR-125b-5p抑制劑注射到卡介苗（BCG）感染的小鼠體內(nèi)時(shí),小鼠體內(nèi)的細(xì)菌載量顯著降低（P<0.05）。本研究證明miR-125b-5p可調(diào)控分枝桿菌在宿主細(xì)胞及小鼠體內(nèi)的生長(zhǎng),在抗結(jié)核免疫過(guò)程中發(fā)揮了重要作用。進(jìn)一步對(duì)其作用機(jī)制的深入研究將為臨床結(jié)核病的治療提... 

【文章來(lái)源】：微生物與感染. 2020,15(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

圖1 分枝桿菌感染不同類(lèi)型的細(xì)胞誘導(dǎo)了細(xì)胞內(nèi)miR-125b-5p的上調(diào)表達(dá)

用BCG感染吞噬細(xì)胞后,再轉(zhuǎn)染miR-125b-5p抑制劑來(lái)減低細(xì)胞內(nèi)miR-125b-5p的表達(dá)量。菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果表明,在被抑制劑轉(zhuǎn)染的A549細(xì)胞中,BCG菌落數(shù)目約是對(duì)照組的50%(圖3B,左圖)。同樣,在被抑制劑轉(zhuǎn)染的巨噬細(xì)胞THP-1和RAW264.7中,BCG的菌落數(shù)目都比對(duì)照組顯著降低(圖3B,中、右圖)。結(jié)果說(shuō)明,在轉(zhuǎn)染miR-125b-5p抑制劑后,分枝桿菌在細(xì)胞內(nèi)的生長(zhǎng)數(shù)目減少。表明miR-125b-5p的表達(dá)能夠促進(jìn)分枝桿菌在細(xì)胞內(nèi)的生長(zhǎng)。圖3 miR-125b-5p及其抑制劑對(duì)細(xì)胞內(nèi)感染的BCG生長(zhǎng)的影響

圖2 miR-125b-5p在BCG感染的C57BL/6小鼠肺部的表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組2.3 miR-125b-5p抑制劑減低分枝桿菌感染小鼠體內(nèi)的細(xì)菌載量

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中性粒細(xì)胞在抗結(jié)核免疫中的作用[J]. 熊坤龍,程訓(xùn)佳,張文宏,王菲菲.  微生物與感染. 2018(03)
[2]結(jié)核分枝桿菌感染相關(guān)microRNA的研究進(jìn)展[J]. 王杰,劉春法,崔永勇,趙德明,周向梅.  畜牧與獸醫(yī). 2016(10)
[3]結(jié)核分枝桿菌與巨噬細(xì)胞相互作用的研究進(jìn)展[J]. 王靜嫻,楊春.  微生物與感染. 2010(03)



本文編號(hào)：3562591