發(fā)布時間：2021-12-31 22:41

　　研究背景:在周圍神經(jīng)系統(tǒng)（peripheral nervous system,PNS）損傷中,軸突再生是神經(jīng)功能恢復(fù)的基本過程。神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells,NSCs）在體外能夠發(fā)揮分化成各種神經(jīng)細(xì)胞,例如神經(jīng)元和少突膠質(zhì)細(xì)胞等神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。目前,已經(jīng)廣泛利用這些能力來產(chǎn)生用于臨床應(yīng)用的各種神經(jīng)細(xì)胞并且作為治療神經(jīng)疾病的潛在手段。在周圍神經(jīng)再生中,施萬細(xì)胞（schwann cells,SCs）與神經(jīng)的再生緊密聯(lián)系,它沿神經(jīng)元的突起分布,包裹在神經(jīng)纖維上形成髓鞘。SCs能通過分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子、蛋白等多種活性物質(zhì),促進(jìn)受損的神經(jīng)元的存活及其軸突再生,參與周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)纖維的構(gòu)成。在外周神經(jīng)損傷后,SCs被激活去分化,參與去除髓鞘碎片,為軸突再生提供途徑。移植的SCs已經(jīng)顯示出在動物實(shí)驗(yàn)中有促進(jìn)神經(jīng)再生的作用。然而,SCs的臨床治療效果往往受其來源的諸多限制,我們課題組先前的研究已經(jīng)獲得人胚胎干細(xì)胞源神經(jīng)干細(xì)胞（human embryonic stem cell derived-neural stem cells,h ESC-NSCs）,理論上人神經(jīng)干細(xì)胞源施萬樣細(xì)胞（... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

人胚胎干細(xì)胞來源的神經(jīng)干細(xì)胞(hESC-NSCs)及人神經(jīng)干細(xì)胞源施萬樣細(xì)胞(SC-likecells)

B，C）。RT-qPCR結(jié)果表明，與hESC-NSCs相比，神經(jīng)干細(xì)胞標(biāo)記物如NESTIN，SOX1，SOX2和PAX6在SC-like cells中的表達(dá)水平下降，其中NESTIN，SOX1，SOX2表達(dá)水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2.2 D）；幾種神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物，包括MBP、P0、P75NTR、PMP-22、GFAP、HNK-1和S100β（圖2.2 E），在SC-likecells中表達(dá)量均上調(diào)。 圖2.2 F為SC-like cells的膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物普通PCR分析。圖 2.2：SC-like cells膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物的細(xì)胞定位及基因表達(dá)A-C：SC-like cells的GFAP (A)、P75NTR(B)和S100β（C）細(xì)胞免疫熒光定位；D：hESC-NSCs

經(jīng)干細(xì)胞源施萬樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化及施萬樣細(xì)胞微囊泡對軸突再生作用ell MVs蛋白，放置-20℃以備用。白標(biāo)準(zhǔn)品及BCA工作液的配制g BCA 加入 0.4mL 蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后取適量稀釋 50 倍，即現(xiàn)劑 A：BCA 試劑 B=50：1 的比例配制適量 BCA 工作液。-like cell MVs 蛋白濃度的檢測6 孔板中設(shè)置 8 孔蛋白標(biāo)準(zhǔn)品，濃度依次為 0、0.025、0.05、0.5 mg/mL（總體積 20 μL）；另加 20 μL 稀釋一定倍數(shù)的待測品孔中后，上述各孔加入 200μLBCA 工作液，37℃孵育 30 測定各孔 540 nm 波長下吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算待測如圖 3.1 所示：

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3561116