金屬還原酶FreB2對(duì)煙曲霉鐵吸收及氧化壓力應(yīng)答的影響
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【摘要】:利用構(gòu)建的煙曲霉金屬還原酶基因(AFUA-1G00350,Fre B2)缺失突變株,對(duì)煙曲霉金屬還原酶基因Fre B2功能進(jìn)行初步研究,為揭示該基因與煙曲霉的致病關(guān)系提供依據(jù)。比較野生株和基因缺失突變株在AMM和無(wú)鐵AMM液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)高鐵還原酶的活性,繪制不同時(shí)間野生株和基因缺失突變株在AMM和無(wú)鐵AMM液體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)時(shí)高鐵還原酶活性曲線。利用Real-Time PCR方法分析Sre A、Sid A、Fet C、Ftr A和Fre B這些與鐵的吸收相關(guān)基因的mRNA的表達(dá)量變化。測(cè)定野生株和基因缺失突變株對(duì)氧化壓力的敏感性及胞內(nèi)活性氧物質(zhì)含量。不論在AMM液體培養(yǎng)基中還是在無(wú)鐵AMM液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí),突變株高鐵還原酶的活性都明顯高于野生株高鐵還原酶活性。與野生株相比培養(yǎng)60 h時(shí),突變株Sre A、Sid A、Fet C、Ftr A和Fre B這些與鐵的吸收相關(guān)基因的表達(dá)量出現(xiàn)明顯上調(diào)。氧化壓力敏感性實(shí)驗(yàn)顯示,基因缺失突變株對(duì)H2O2的敏感性顯著增強(qiáng),同時(shí)胞內(nèi)活性氧物質(zhì)含量明顯增多。金屬還原酶基因Fre B2在煙曲霉鐵吸收及氧化壓力應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮作用;煙曲霉與鐵吸收相關(guān)基因之間存在功能互補(bǔ)效應(yīng)。
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 煙曲霉 金屬還原酶 Real-Time PCR 活性氧物質(zhì)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(30840014) 教育部留學(xué)回國(guó)基金 山東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(ZR2010CM011)
【分類(lèi)號(hào)】:Q93
【正文快照】: 化還原特性使其能夠作為許多關(guān)鍵酶類(lèi)的輔助因子參與細(xì)胞內(nèi)一系列重要的代謝過(guò)程[2-3]。鐵離子濃度與煙曲霉的生長(zhǎng)和致病性密切相關(guān)[4]。煙曲霉菌從宿主體內(nèi)獲得鐵的能力是其致病性的重要條件[5]。在人體內(nèi),鐵通常以乳鐵蛋白或載鐵蛋白的形式存在,且哺乳動(dòng)物的免疫系統(tǒng)有通過(guò)
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本文編號(hào):350256
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