目的基于重組酶介導的等溫擴增技術（Recombinase-aided isothermal amplification assay,RAA）建立一種快速檢測多房棘球絳蟲的核酸檢測方法,并進行檢測效果評價。方法以多房棘球絳蟲線粒體基因序列（GenBank登錄號:AB018440）作為靶序列,根據RAA反應原理設計并合成引物,利用該引物進行RAA擴增。以聚合酶鏈反應（PCR）作為平行對照,應用RAA方法擴增不同稀釋濃度的多房棘球絳蟲基因組DNA及梯度稀釋的含不同拷貝數目的基因片段的pMD19-T（Simple）克隆質粒,以評價RAA檢測的敏感性。應用此方法檢測細粒棘球絳蟲（G1型）、牛帶絳蟲、亞洲帶絳蟲、多頭帶絳蟲、犬復孔絳蟲、犬弓首蛔蟲、毛首鞭形線蟲、藍氏賈第蟲、肝片吸蟲、衛(wèi)氏并殖吸蟲、大片吸蟲以及華支睪吸蟲基因組DNA,以評價其特異性。在對建立的方法進行條件優(yōu)化后,檢測9份感染多房棘球蚴的動物組織樣本、3份模擬現場多房棘球蚴感染陽性犬糞樣本以及2份現場陽性犬糞樣本,以驗證所建立的RAA方法的可靠性和實用性。結果所建立的RAA法可在40 min內特異性擴增多房棘球絳蟲目的基因片段。以多房... 

【文章來源】：中國血吸蟲病防治雜志. 2020,32(02)北大核心CSCD

【文章頁數】：7 頁

【部分圖文】：

多房棘球蚴包囊基因組DNA擴增產物瓊脂糖凝膠電泳結果

不同RAA反應時間擴增產物瓊脂糖凝膠電泳結果

以多房棘球絳蟲基因組DNA為模板的RAA法檢測敏感性

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3489319